厌氧微生物的分离及培养.pptVIP

厌氧微生物的分离及培养;一、目的要求;二、基本原理 ;碱性焦性没食子酸法 焦性没食子酸与碱溶液（NaOH、Na2CO3和NaHCO3）作用后形成易被氧化的碱性没食子酸盐，能通过氧化作用而形成黑、褐色的焦性没食子橙从而除掉密封容器中的氧。 这种方法的优点是无需特殊及昂贵的设备，操作简单，适于任何可密封的容器，可迅速建立厌氧环境。而其缺点是在氧化过程中会产生少量的一氧化碳，对某些厌氧菌的生长有抑制作用。同时，NaOH的存在会吸收掉密封容器中的二氧化碳，对某些厌氧菌的生长不利。用NaHCO3代替NaOH，可部分克服二氧化碳的被吸收问题，但却又会导致吸氧速率的减慢。;厌氧罐培养法 利用一定方法在密闭的厌氧罐中生成一定量的氢气，而经过处理的钯或铂可作为催化剂催化氢与氧化合成水，从而除掉罐中的氧而造成厌氧环境。 例如：利用镁与氯化???遇水后发生反应生成氢气，及碳酸氢钠加柠檬酸水后产生CO2，而厌氧罐中使用的厌氧度指示剂一般都是根据美蓝在氧化态时呈蓝色，而在还原态时呈无色的原理设计的。 疱肉培养基法 碱性焦性没食子酸法和厌氧罐培养法都主要用于厌氧菌的斜面及平板等固体培养，而疱肉培养基法则在对厌氧菌进行液体培养时最常采用。其基本原理是，将精瘦牛肉或猪肉经处理后配成疱肉培养基，其中既含有易被氧化的不饱和脂肪酸能吸收氧，又含有谷胱甘肽等还原性物质可形成负氧化还原电势差，再加上将培养基煮沸驱氧及用液体石蜡凡士林封闭液面，可用于培养厌氧菌。这种方法是保藏厌氧菌，特别是厌氧的芽胞菌的一种简单可行的方法。若操作适宜，严格的厌氧菌都可获得生长。 ;三、实验器材 ;六、思考题;