微生物检测培训--培养基.pptx

Summary from Global Micro Training Material  - 培养基和配制 学习目的 Identify the different categories of media used in the lab / 识别用于不同实验的培养基 Identify the specific media used in each category / 识别不同试验中的各种培养基 Explain how typical media are made / 学习培养基的准备方法 Explain how to store media / 学习培养基的储存 主要内容 介绍 实验室使用的培养基 一般培养基 选择培养基 培养基的配制 培养基的储存 微生物实验的重要性 充分理解哪些微生物会影响我们的产品只是我们保护我们产品和品牌的第一步; 同时, 我们必须通过对我们的原料, 半成品和最终产品的微生物检测来确保符合公司有关质量和安全的要求. 进行微生物实验最重要的手段之一就是是微生物生长的营养培养基. 我们会一一介绍 可口可乐公司微生物实验室使用的各种不同种类的培养基, 它们的配制和储存, 它们如何使用以识别不同的微生物等等 第一章 培养基 我们可能会肉眼看见或者直接闻到一些腐败的现象, 我们也可以在显微镜下识别一些微生物, 然而, 为了了解哪些微生物需要更复杂一些的实验, 我们还需要更大的样本量. 一般来说, 我们通过营养培养基让微生物在实验室 生长. 简单来说, 培养基就是一种物质, 液态的或者固态的, 包含一系列微生物生长的营养物质. 由于微生物种类繁多, 我们有很多不同种类的培养基, 每一种都有不同的混合的营养物质或者化学品. 培养基让微生物学家能够判断特定微生物种群是否存在或者数量多少. 营养培养基分为三个主要类型: 一般培养基, 选择培养基, 差异培养基 第二章 培养基的分类 按照培养基的用途分: 普通培养基 选择性培养基 差异培养基 氮源: 肉汤提取物, 植物提取物, 使微生物能获得足够的营养生长 碳源: 葡萄糖, 用以合成所需要的有机物质 缓冲液: 中和细菌产生的酸 除了氮源, 碳源和缓冲液外, 还包含一些能够抑制某些生长的化学物质. 比如: 1) Endo琼脂中含有亚硫酸钠可以抑制革兰氏阳性细菌的生长; 2) 酸化的橙血清琼脂可以减缓非嗜酸细菌的生长 可以帮助超过一种目标微生物生长. 微生物在这样的培养基上的形态或者颜色是不一样的.在日常操作中, 普通培养基和选择性培养基用的比较多 按照培养基的形态分: 肉汤: 常用于增加微生物的数量以达到可检测的水平 琼脂 (固态) 碳水化合物, 维生素, 矿物质, 酸化剂等各种旨在促进微生物生长的物质 加入了多聚糖(琼脂). 为不同需求而制备, 比如: 1) 商业无菌肉汤用于浓缩液厂来检测主剂, 这个配方抑制细菌而让酵母菌正常生长; 2) 橙血清肉汤包含了橙的组分而使嗜酸的微生物能很好生长 琼脂是理想的固化剂: 1) 大多数微生物不能消化; 2) 可以和许多营养成分混合; 3) 也可以通过加入不同的原料满足不同的测试需要 第二章 选择性培养基 选择性培养基能够培养特定的微生物, 举例来说, 当需要得知酵母菌数量时候, 可以选择相应的培养基 选择性培养基包含了营养成分和其他某种”允许”生长物质, 可能包含一些抑制剂来防止可能影响实验的微生物的生长. 选择性培养基可以用来识别酵母菌和霉菌, 嗜酸细菌, 和其他细菌, 比如大肠菌群. 第四章 霉菌和酵母菌 M-Green: 含有丰富的蛋白胨非常有利于微生物生长 pH 4.6抑制了大部分细菌的生长 溴甲酚绿(pH=3.8时呈黄色，pH=5.4时呈蓝绿色，pH=4.5时开始有颜色的明显变化)是指示剂, 大部分菌落被里面的色素变成率绿色, 酸性物质扩散到培养基把它变成黄色. 第四章 霉菌和酵母菌培养基 酸化培养基 RBCA 橙血清琼脂(OSA), 土豆葡萄糖琼脂 (PDA), 麦芽提取物琼脂(MEA) 孟加拉红氯霉素选择性培养基 是最常用的检测果汁里的总嗜酸菌的培养基. pH5.5的OSA和5.6的PDAMEA比较高, 不能有效抑制大部分细菌, 所以使用酸化的方法来有效的分析嗜酸菌 一般酒石酸用来酸化OSA和PDA, 而对于MEA, 乳酸和酒石酸都可以用 最终的pH为4.2-4.4 仅限于霉菌测试, 一般用于空气样品. 含有氯霉素以抑制细菌生长 孟加拉红抑制霉菌的大小和扩散, 并且把菌落染成粉红色 第四章 耐热霉菌 / 耐热细菌 耐热霉菌 (HRM) 耐热细菌 (TAB) 一些霉菌孢子能够抵抗巴氏灭菌过程而存活于饮料中. 为了了解耐热霉菌是否存在, 我们需要取少量样品到肉汤培养基并加热灭活, 通过一定的培养