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环境毒理学——鱼类毒性试验 化研1215 王伟龙 指导老师 林爱军 日 期 环境毒理学——鱼类毒性试验 主要内容 前言 目的与要求 实验原理 3 实验步骤 实验报告 注意事项 7 5 1 2 6 实验材料与实验条件 4 环境毒理学——鱼类毒性试验 1 前言 鱼类是水生食物链的顶级生物，也是水体中最为重 要的经济动物。在污染水体中，当污染物达到一定浓 度时，就会引起鱼类各种中毒反应。在人为控制条件 下，进行各种鱼类毒性实验，不仅用于化学品毒性强 度测定、水体污染程度、废水及其处理效果检查，而 且也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放 提供科学依据。 环境毒理学——鱼类毒性试验 2 目的与要求 通过本实验，熟悉和掌握鱼类急性毒性试验的设 计、条件、操作步骤，以及试验结果的计算、分析和 报告拟写等全过程。 环境毒理学——鱼类毒性试验 3 实验原理 鱼类对环境反映灵敏 引起中毒 污染物浓度达到一定程度 行为异常 组织细 胞病变 生理功 能紊乱 死亡 环境毒理学——鱼类毒性试验 3 实验原理 确定半数致死浓度（24h LC50、48h LC50、72h LC50和96h LC50），并记录无死亡的最大浓度和导致鱼类全部死亡的最小实验浓度。鱼类急性毒性试验不仅用于测定化学物质毒性强度、测定水体污染程度、检查废水处理的有效程度，也为制定水质标准、评价环境质量和管理废水排放提供环境依据。 表3-1 不同溶液浓度和不同培养时间下鱼类的死亡率 返回 环境毒理学——鱼类毒性试验 4 实验材料与实验条件 4.3 实验溶液的制备 以重铬酸钾为实验毒物，实验溶液的母液由蒸馏水 配制而成。母液最好每日配各1次，比较稳定的物质也 可以两日配制1次，配好后，最好低温保存。配制好的 母液可以稀释为进行毒性实验的溶液， 以等比或等对 数间距设置浓度系列，相临浓度比值不得超过2.2（母 液3L，50g/L重铬酸钾）。 环境毒理学——鱼类毒性试验 4 实验材料与实验条件 4.4 实验用水（稀释水） 高质量的自然水 标准稀释水 未受污染 的清洁水 天然湖水、河水或地下 水，需要过滤等处理。 实验方法配制 环境毒理学——鱼类毒性试验 4 实验材料与实验条件 4.4 实验用水（稀释水） 溶液中钙离子和镁离子的总和是2.5mmol/L。 Ca: Mg为4: 1， Na : K 为10:1。必要时，用氢氧化钠溶液或盐酸调节pH，使其稳定在7.8±0.2。稀释用水需经曝气直到氧饱和为止，然后储存备用，在使用前不必再曝气。 环境毒理学——鱼类毒性试验 4 实验材料与实验条件 4.5 水质条件 确保试液温度控制在23℃±1℃ 水温 实验液的pH在6.7～8.5为宜 pH 至少应保持在4mg/L以上，不低于空气饱和值的60% DO 水的总硬度为 10～250 mg/L 硬度 以96h为宜（至少24h） 周期 系统承载量为1.0g鱼/L溶液 负荷 12-16h/d 光照 环境毒理学——鱼类毒性试验 4 实验材料与实验条件 4.6 实验液更换方式 每隔一定时间更换一次试验药液。适用于试验浓度在更换试验药液的时间内保持相对稳定的物质。 试验期间不需更换试验液，限于测定那些化学性质比较稳定的物质。 试验药液连续更新，可用于大多数物质，包括水中不稳定的物质。 静水式 换水式 流水式 环境毒理学——鱼类毒性试验 5 实验步骤 第六页 设置跨度较大 的浓度范围 每个浓度下放入 5条鱼，静态实验 每天记录鱼的死 亡率，取出死鱼 24h全死亡浓度Cm 96h无死亡浓度C0 3~6h后观察鱼类 活动异常行为 24h、48h、72h、96h 后检查受试鱼的状况 实验结束测pH、DO 温度、受试物浓度 无以上结果，另取 浓度范围重新实验 C0~Cm间设5个浓度组 每个浓度3个平行实验 每系列一个空白对照 实验开始测pH、DO 温度、受试物浓度，期 间日测一次pH、DO、t 第一阶段——预处理：为正式实验确定浓度范围。 第二阶段——正式实验：确定不同溶液浓度和不同培养时间下鱼类的死亡率，找出24h、48h、72h、96h时的LC50值。