嗅鞘细胞表型特性和对mSOD1G93AALS大鼠的治疗研讨.pdf

目 录 实验一………………………………………………………………………………………1 人胚胎嗅球嗅鞘细胞的培养及免疫组织化学表型鉴定…………………………………1 中文摘要………………………………………………………………………………．1 英文摘要………………………………………………………………………………．．3 符号说明………………………………………………………………………………．6 前言……………………………………………………………………………………………………………．．7 材料与方法……………………………………………………………………………．9 结 果…………………………………………………………………………………16 讨论……………………………………………………………………………………………………………24 结 论……………………………j……………………………………………………………………………．．29 参考文献………………………………………………………………………………30 实验二……………………………………………………………………………………．．35 中文摘要………………………………………………………………………………35 英文摘要………………………………………………………………………：………．38 符号说明………………………………………………………………………………41 前言……………………………………………………………………………………………………………42 日U 吾……………………………………………………………………………………………………………qz 材料与方法……………………………………………………………………………43 结 果……………………………………………………………………………………………………………54 讨论……………………………………………………………………………………………………………65 结论……………………………………………………………………………………………………………71 参考文献………………………………………………………………………………72 致谢…………………………………………………………………………………………………………………．77 攻读学位期间发表的学术论文…………………………………………………………．．78 原创性声明…………………………………………………………………………．．79 ／㈣㈣ 实验一人胚胎嗅球嗅鞘细胞的培养及免疫组织化学表型鉴定 研究生：李 莹 专 业：神经生物学 导 师：黄红云教授 段耀奎教授 中文摘要 目的 大量的临床研究显示，嗅鞘细胞移植可治疗多种中枢神经系统疾病。然 而目前临床所使用的嗅鞘细胞严格意义上说，是嗅球来源以嗅鞘细胞为主的 混合细胞。本实验的目的旨在更深入的研究和讨论临床移植所用嗅鞘细胞各 种成分的含量及其在嗅神经层和嗅球小球层的分布情况。 方法 1．嗅球免疫组织学研究：取孕20周胚胎嗅球标本，4％的多聚甲醛固定 液固定2小时，随后置于蔗糖溶液中，待沉糖后做连续冰冻切片。分别做P75 2．嗅鞘细胞的培养：无菌条件下，用显微器械将胚胎的嗅球取出，在 解剖显微镜下仔细剥离嗅球表面的软磨和血管，尽量保持嗅球的完整性，然 后用眼科剪反复剪碎，剪成O．5．1．0mm，大小的组织块，将组织块移入离心管 内，加入含有13％胎牛血清的D／F12培养液，用弯头吸管来回轻轻吹打组织 块，制成细胞悬液，胰蛋白酶消化后收集细胞，以20％的血清培养基制成细 胞悬液平均铺入细胞培养板中，在C02培养箱中培养。 3．嗅鞘细胞的鉴定：将培养好的细胞以105／ml的浓度接种于置放盖玻