生理药理学教学中的离体蛙心灌流实验的操作和改进的心得体会.docVIP

精品论文 参考文献 生理药理学教学中的离体蛙心灌流实验的操作和改进的心得体会 王海波 （江苏联合职业技术学院南通分院 226600） 【摘要】目的 探讨在生理药理学教学中离体蛙心灌流实验的操作步骤、观察分析和改进措施的心得体会。 方法 对离体蛙心灌流实验中改进操作方法、加强观察、细致分析讨论、并认真总结。结果 五组实验全部获得成功，结果无明显差异；让学生们掌握了离体蛙心灌流实验方法、熟悉了心肌生理特征和各种离子药物因素对心脏活动的影响。结论 让医学生们勤动手、多动脑，不断改进操作方法、细心观察分析、认真讨论总结，能提高实验的成功率、取得良好的实验结果、加强理论联系实际，巩固和增长知识，值得在生理药理学教学中推广和应用。 【关键词】 生理药理学教学 蛙心灌流实验 心得体会 【中图分类号】R3 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2012）30-0292-02 离体蛙心灌流实验是生理学及药理学教学的一个重要实验，也是一个对操作手法要求很高的实验；心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境中才能维持，一旦这个环境被干扰，心脏活动就会受到影响[1]。我校生理学和药理学教研室一直非常重视这方面的实践教学，按照教学大纲要求开展了离体蛙心灌流实验，并组织分析和讨论，现报告如下： 1 资料与方法 1.1 实验目的 按照生理学和药理学教学大纲的相关要求，学习和改进离体蛙心灌流实验的操作方法，观察Na+、K+、Ca2+三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等各种因素对心脏活动的影响，掌握内环境理化因素的相对稳定对维持心脏正常节律性活动的重要作用，了解相关药物对心脏活动的调节意义。 1.2 实验原理 ①心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动；②在本实验中，将蟾蜍的离体心脏用类似于其血浆的代体液灌流时，在一定时间内仍可保持有节律的舒缩活动；③心肌细胞分类有心房肌、心室肌、浦肯野细胞等快反应细胞和窦房结细胞、房室交界区细胞等慢反应细胞；④心肌细胞的生理特征有自律性、兴奋性、传导性、收缩性；⑤改变灌流液的理化特性时，心脏的节律舒缩亦随之改变，说明内环境理化因素的相对稳定是维持心脏正常节律性活动的必要条件。 1.3 器材用品 蟾蜍30只、蛙类解剖手术器械、蛙心插管、蛙心夹、双凹夹、试管夹、铁支架、滴管、棉球、缝线、滤纸、烧杯、玻璃分针、张力传感器、生物信息采集系统，任氏液、1%氯化钠溶液(NaCL)、2%氯化钙溶液(CaCL2)、1%氯化钾溶液(KCL)、1:10000肾上腺素溶液（NA）、1:100000乙酰胆碱溶液(ACh)等。 1.4 蛙心制备 将学生分为五组，均由实验室老师带教。取蟾蜍一只，用探针破坏其脑脊髓后将其仰卧固定于蛙板上，用外科剪剪开胸前区皮肤、粗剪刀剪除胸壁；用眼科镊提起心包膜，用眼科剪在收缩期时将其剪开，暴露心脏，让学生们识别心脏的各个部分并观察心脏搏动；先在右主动脉下带线预置两根缝线，带线结扎左主动脉，用玻璃分针将蛙心翻向背面，分离后腔静脉，在后腔静脉和静脉窦下带线预置；右主动脉预置线打活结备用，用眼科剪在其靠近动脉圆锥处作一向心楔形切口，将盛装有少量任氏液的蛙心插管插入动脉圆锥，在心室收缩期时推入心室腔内，同时结扎后腔静脉和动脉圆锥上方的预置线，并固定在蛙心管外侧的小钩上；成功的标志为可见插管内液体随心室波动而上下移动，轻轻上提蛙心、剪除左右主动脉，在静脉窦下方将左右肺静脉和前后腔静脉一并结扎切断，游离出蛙心；用任氏液冲洗出管内血液，直至澄清为止，并保持蛙心湿润[2]。 1.5 实验操作 ①连接仪器：用双凹夹将蛙心固定在铁支架上，将张力传感器固定在蛙心插管下方，蛙心夹夹在心尖，通过连接线连接于生物信息采集系统，打开电脑描记正常的蛙心搏动曲线。②药物实验：先向插管内加入1% NaCL溶液1～2滴，混匀后观察和描记曲线变化；用新鲜任氏液换洗待曲线恢复正常后，加入2% CaCL2溶液1～2滴，观察和描记曲线变化；加入1% KCL溶液1滴，混匀后观察和描记曲线变化；加入1:10000 NA溶液1～2滴，观察和描记曲线变化，待效应明显后吸出灌流液，加入新鲜任氏液，使心搏恢复正常；加入1:100000 ACh溶液1～2滴，观察和描记曲线变化，待效应明显后吸出灌流液，如果心搏停止可将灌流液滴入心室，反复几次洗净心室内的ACh溶液，一般能将心搏复苏。 2 实验结果 五个实验小组的蛙心制备均获得成功，加入药物实验的结果基本相同，无明显差异。（见表1） 表1：两组的操作时间、插管和实验成功率情况比较（P＜0.05） 观察项目 1% NaCL 2% CaCL2 1% KCL 1:100