生脉注射液细菌内毒素检查方法的探讨.docVIP

精品论文 参考文献 生脉注射液细菌内毒素检查方法的探讨 王欣放（辽宁省朝阳市食品药品安全监督所 122000） 【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）25-0213-02 【摘要】目的 建立生脉注射液的细菌内毒素检查方法。方法 采用《中国药典》2010年版附录检测细菌内毒素的凝胶法。用不同厂家的鲎试剂与同厂家和不同厂家生产的生脉注射液分别进行干扰试验，考察生脉注射液对细菌内毒素检查的干扰作用，确定其最小不干扰稀释倍数。结果 实验证明，生脉注射液对细菌内毒素检查有抑制作用，经稀释至40倍后干扰作用完全被消除。结论 使用鲎试剂凝胶法检查生脉注射液的内毒素是可行的，可以用细菌内毒素检查法取代原检查法。 【关键词】生脉注射液 凝胶法 细菌内毒素 鲎试剂 干扰试验 生脉注射液临床上主要用于心绞痛、失血性、感染性休克、心律失常、心肌炎、低血压等病证的治疗。现行质量标准为卫生部药品标准规定的检查项为热原检查法[1]，本文对生脉注射液采用细菌内毒素法进行可行性研究，为其建立细菌内毒素检查法提供试验依据。现将研究结果报告如下。 1试验材料与仪器设备 ZH-2型自动旋涡混合器（天津药典标准仪器厂）；DR-HW-1电热恒温水浴箱（天津医疗器械厂）； 鲎试剂（TAL）[湛江安度斯生物有限公司 批号：1110026 灵敏度（lambda;）:0.25Eubull;ml-1；批号：1112082，灵敏度（lambda;）：0.125 Eubull;ml-1；湛江博康海洋生物有限公司 批号：1106120， 灵敏度（lambda;）：0.25 Eubull;ml-1批号：1104110，灵敏度（lambda;）：0.125 Eubull;ml-1] 细菌内毒素检查用水（中国药品生物制品检定所 批号：201112 规格：10ml/支） 细菌内毒素工作标准品（中国药品生物制品检定所 批号：150601-201174 160 Eu /支） 生脉注射液 （山西太行药业股份有限公司 批号：110222 .110514.110424 规格：10ml/支；上海和黄药业有限公司 批号规格：10ml/支）。 2 方法与结果 2.1鲎试剂灵敏度复核 按细菌内毒素检查法[2]“鲎试剂灵敏度复核试验”项下操作，4批鲎试剂lambda;c均在0.5lambda;—2.0lambda;之间表明灵敏度符合规定，可用于试验。 2.2细菌内毒素限值确定[2] 按照细菌内毒素限值公式L=K/M K为按规定的给药途径，人用每公斤体重每小时最大可接受的内毒素剂量，注射剂为5.0Eu/㎏bull;h-1, M为人用每公斤体重每小时的最大供试品剂量。生脉注射液为60ml，成人体重按60㎏计,计算L=5.0/60/60=5Eubull;ml-1。 2.3干扰试验预试验。 按照细菌内毒素检查法[3]进行干扰预试验,根据公式MVD﹦Cbull;L/lambda;确定供试品的有效稀释倍数范围。现今我国市售TAL灵敏度通常为0.5-0.03Eu/ml, 根据公式MVD﹦Cbull;L/lambda;计算出供试品的有效稀释倍数范围为：10—160倍。用细菌内毒素检查用水分别将两个厂家的生脉注射液依次稀释成10，20，40，80，160倍系列浓度的药液，记作（NPC）系列，另制备同样系列浓度的供试液,并使每一供试液均含有2lambda;浓度（0.5Eubull;ml-1）的内毒素溶液记作（PPC）系列.每一浓度设两管，取lambda;：0.25 Eubull;ml-1鲎试剂分别与上述NPC和PPC系列溶液反应，并同时作阴性对照和阳性对照结果见表1 表1 干扰预试验结果 鲎试剂厂家 供试品批号 系列 供试品稀释倍数 10 20 40 80 160 NC PC 湛江安度斯生物有限公司 110222 NPC - - - - - - - - - - - - + + PPC - - - - + + + + + + 110514 NPC - - - - - - - - - - PPC - - + - + + + + + + 110424 NPC - - - - - - - - - - PPC - -