银胶浓度对电穿孔获取细胞内表面增强拉曼光谱的影响.PDFVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 201 1, 38(10): 961~966 胶浓度对电穿孔获取细胞内 表面增强拉曼光谱的影响* 1, 2) 1) 2) 3) 1) 3) 1) 1)** 俞允 林居强 黄 浩 陈燕坪 冯尚源 苏 颖 陈杰斯 陈 荣 (1) 福建师范大学，医学光电科学与技术教育部重点实验室， 建省光子技术重点实验室，福州350007 ； 2) 3) 福建中医药大学中西医结合学院，福州350108 ； 建省肿瘤医院，福州350001) 摘要 探究了银胶浓度对于电穿孔导入银纳米粒子获取细胞内表面增强拉曼光谱(SERS)的影响 对6 组含有不同浓度银胶的 鼻咽癌细胞C666 进行电穿孔，测量电穿孔后活细胞内表面增强拉曼光谱 以测得的SERS 信号、光谱强度积分值和谱线重 复性为指标，研究银胶浓度对电穿孔获取细胞内SERS 的影响，对电穿孔后活性C666 细胞内SERS 平 光谱进行初步谱峰 归属 在脉冲电场强度875 V/cm，脉冲持续时间 1 ms ，电脉冲2 次的条件下，每500 l 电击缓冲液中含有50 l 银胶时测 得的细胞内SERS 光谱信噪比高，且光谱具有较好的重 复性 结果说明，正确选择银胶浓度可以提高电穿孔-SERS 效果， 获取高质量的活细胞内SERS 信号 此研究有助于扩展表面增强拉曼光谱的应用，包括实时检测分析活细胞内生化成分及分 布，实时监测细胞生化变化过程等 关键词 表面增强拉曼散射(SERS)，电穿孔，C666 细胞，银胶浓度 学科分类号 G633.91，Q6 DOI: 10.3724/SP.J.1206.20 11.00106 表面增强拉曼散射(surface enhanced Raman 寻找一种方法使纳米粒子快速进入细胞，以实现细 scattering ，SERS)具有良好的特异性、选择性和敏 胞内SERS 光谱实时检测，对细胞等生命组织的研 感性，在生物化学分析中发挥重要作用 人们将 究具有重 意义 金、银纳米粒子导入活细胞内增强拉曼信号，然后 为实现上述目标，我们首次提出并实现了电穿 检测细胞SERS 光谱，可分析活细胞内生化物质成 孔-SERS 方法，即利用电穿孔技术，在 1 min 内快 [1] 速将金、银纳米粒子导入活性细胞，并成功测得活 分 (如核酸、蛋白质等)，利用光谱成像监测细胞 内生化物质分布以及变化过程[2-3] 当金、银纳米 细胞内SERS 信号[8] 电穿孔-SERS 技术将细胞置 粒子结合各种信号探针以及不同抗体、蛋白质后， 于可控电场中，在适当的脉冲电场作用下，细胞膜 [9-10] 导入细胞具有靶向作用，可与细胞内特定物质结 出现可逆性微小孔洞，暂时提高细胞膜通透性 ， 合，利用SERS 光谱的高灵敏性形成SERS 传感作 使周围介质中的纳米粒子更容易进入细胞内，细胞 [4] [5] 用，如细胞pH 探针 、SERS 免疫探针 等 当前 膜恢复后纳米粒子就滞留在细胞内，作为拉曼信号 将金、银纳米粒子导入活细胞的常用方法是将细胞 增强基底 控制电脉冲参数使细胞膜发生可逆性穿 与纳米粒子混合孵育培养，利用细胞内吞作用使 孔，就可以在保 细胞活性的情况下，实现快速