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[理学]细胞和基因工程

一、细 胞 细胞 植物细胞模式图 动物细胞模式图 细胞学说的内容 细胞学说是1838~1839年间由德国的植物学家施莱登(Schleiden)和动物学家施旺(Schwann)所提出,直到1858年才较完善。它是关于生物有机体组成的学说。 主要内容有: ① 细胞是有机体, 一切动植物都是由单细胞发育而来, 即生物是由细胞和细胞的产物所组成; ② 所有细胞在结构和组成上基本相似; ③ 新细胞是由已存在的细胞分裂而来; ④ 生物的疾病是因为其细胞机能失常; ⑤细胞是生物体结构和功能的基本单位; ⑥生物体是通过细胞的活动来反映其功能的。 细胞学说的意义 它从细胞水平提供了有机界统-的证据,证明了植物和动物有着细胞这-共同的起源。即所有的植物和动物组织都是由细胞构成的。虽然植物的细胞在形状上与动物的细胞有很大的不同,但是,由于在系统的发生上,所有的植物和动物都是由原始的单细胞生物演化而来的,而且在个体发生上,所有细胞都是由细胞分裂或细胞融合所产生的,因此-般细胞都有相同的基本结构和成分。 原生质体 1、原生质体概念:原生质体是细胞去壁后的裸露部分 原生质体融合的过程 ① 原生质体制备 除去胞间层,使单个细胞能游离出来,然后再除去细胞壁 细胞壁的去除主要有两种方法 机械法:研磨、剪切、超声波法 酶法 原生质体的制备 原生质体的制备主要是在高渗压溶液中加入细胞壁分解酶,将细胞壁分离剥离,结果剩下由原生质膜包住的类似球状的细胞,它保持原细胞的一切活性。 在放线菌和细菌中,制备原生质体主要采用溶菌酶;酵母和霉菌一般可用蜗牛酶或纤维素酶等。 ② 融合 (1) 同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合 (2) 异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱导融合。 原生质体的融合过程包括3个主要阶段:1)两个或多个原生质体的质膜彼此靠近;2)局部区域质膜紧密粘连,彼此融合;3)融合完成,形成球形的异核体或同核体。 诱导动物细胞融合,仙台病毒HVJ诱导、PEG法、电融合法都适用;植物细胞融合常用PEG法和电融合法;微生物细胞融合多采用PEG法。 ③ 杂种细胞的筛选 细胞融合是一个随机的物理过程,经融合后细胞将以多种形式出现,需要通过培养和筛选,除去不需要的细胞,分离出需要的杂种细胞,从而解决融合细胞的选择问题。。 A与B融合过程中,你能预见有哪些形式的细胞吗? A-B,A-A,B-B。 A-A-A,B-B-B等多聚体。 未融合的A,B。 植物原生质体融合的过程示意图 植物原生质体融合成功范例 微生物原生质体融合应用 纤维素降解菌原生质体融合 芳香族降解菌的构建 微生物原生质体融合应用 原生质体融合技术在污水工程菌构建上的应用利用微生物处理及利用污水是一个很有效的方法,但是这一技术的应用往往涉及多种微生物,多种菌的优化组合是一个很复杂的课题,原生质体融合技术可以将多个功能组合到一个菌上,为其在污水处理上的应用提供了良好的条件。 许燕滨等采用原生质体融合技术,将两株具有含氯有机化合物降解特性的菌假单胞菌T1和诺卡氏菌RB1融合构建成一株高效降解含氯有机化合物工程菌,应用于造纸漂白废水,融合菌去除CODCr和TCL的能力比混合菌分别提高了72.05%和19.0%。 原生质体融合应用 周德明采用原生原体融合技术将球形红假单胞菌和酿酒酵母构建成高效降解工程菌,工程菌用于废水处理的比降解率明显提高。 程树培等将光合细菌与酵母菌进行原生质体融合,用于连续发酵豆制品废水处理。 程树培等由单亲株灭活法获得的酿酒酵母与热带假丝酵母原生质体融合而成的杂种酵母细胞,在净化味精废水产生单细胞蛋白方面优于双亲菌株,为提高废水的净化效率,增加单细胞蛋白的产量,创造了极为有利的条件。 一、理论方面的三个重要的发现 将S型细菌中的多糖、蛋白质、脂类和DNA等分别提取出来,分别与R 型细菌进行混合。 预期结果:只有DNA与R型细菌进行混合,才能使R型细菌转化成S型细菌。 实验结果:与预期结果吻合。 但是,格里菲斯转化实验所使用的DNA中仍然含有极少量的蛋白质。因此人们认为不能完全排除蛋白质的作用。那么,还有没有更具有说服力的方法来证明DNA是遗传物质呢? 噬菌体侵染细菌的实验——DNA是遗传物质 (1)DNA的双螺旋结构 (1953年Watson and Crick发现) DNA的半保留复制 DNA是遗传信息的载体,故亲代DNA必须以自身分子为模板准确的复制成两个拷贝,并分配到两个子细胞中去,完成其遗传信息载体的使命。而DNA的双链结构对于维持这类遗传物质的稳定性和复制的准确性都是极为重要的。 DNA的半保留复制 DNA在复制过程中,首先打开碱基间的氢键,形成两条单链,然后以每条单链分别作为

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