吉林大学-有机化学精品教学：6-旋光度+纸层析.pptxVIP

有机化学实验公共化学教学与研究中心实验题目：纸层析+旋光度测定实验目的：实验技术与方法层析（色谱）分离技术物理常数——旋光度测定技术科学实验的基本能力和素质实验操作的科学性与规范性实验操作的理性思维实验操作的良好习惯一、层析色谱技术Tesweet（1872～1919），俄国植物生理学家和化学家。1903年，他在波兰华沙大学做了一个玻璃管分离植物色素的实验：三色六带，该实验论文发表在华沙《生物学杂志》1906年，他将该实验更系统的研究论文发表在德国《植物学杂志》上，并首次提出 Chromatography—色谱法。19世纪40年代：瑞典科学家Tiselius，在吸附液相色谱、电泳技术等方面取得创造性成果，并藉此发现了血清蛋白，因此获得了1948年诺贝尔化学奖；英国生物化学家 Martin和Synge，经过11年研究，创建了较完整的分配色谱法，1952诺化奖。Tiselius1902-1971Martin1910-Synge1914，Consden 等发展了纸色谱；1949年，Macllean 等发展了薄层色谱法；1956年，Stahl 开发了薄层色谱板涂布器，推动了TLC 的应用.20世纪50年代：气相色谱诞生；Van Deemter 等发展了描述色谱过程的速率理论。Golay开创了毛细管柱气相色谱法。20世纪60年代：Giddings 总结和扩展了前人的色谱理论，为色谱的深入发展奠定了理论基础；气质联用、高效液相色谱、薄层扫描色谱等现代色谱仪器分析方法相继诞生。20世纪80年代：色谱技术蓬勃发展、广泛应用。毛细管超临界流体色谱（SFC）、毛细管电泳(CE)、多种联用技术等现代色谱技术相继出现。20世纪90年代，伴随计算机技术和化学计量学技术的发展，色谱专家系统和色谱联用技术得到巨大发展和应用。1937-1972年，12个Nobel 奖都有色谱技术的贡献！ 21世纪，色谱在理工农林、医药生物、环保材料等诸多学科和领域发挥着不可代替的重要作用色谱技术—分离科学的历史性革命1903年：差别革命特点：高灵敏度：可实现 ng 级的检测高选择性：可实现同分异构体、对映异构体的构象分离高效能： 快速、微量、在线分析应用广泛：集分离、定性与定量于一体。地位与作用：十分关键，无法替代2010中国药典——鉴别项显微TLCHPLCGC特征图谱2010年版收载总数5402962362522005年版收载总数281114411161新增259181825 912010中国药典——含量测定项检测方法HPLCGCUVTLC-S原子吸收氮测定法挥发油测定法滴定鞣质重量 法品种数85051172921142713项目数95652172921142713新增70924812191910各种分析技术发表论文的统计数据主要分析方法各年代所占比例 %194619551965197519851995仪器分析光谱法14.326.328.729.730.030色谱分析法1.42.312.026.735.036电化学法4.46.210.213.515.016放射分析法1.02.06.513.817.018经典分析比色法23.020.015.29.22滴定法25.622.012.65.11重量法8.56.53.62.0？1. 层析色谱体系的构成与一般原理基于组分的运动特性和运动距离的差异实现分离与纯化。同时，结合其他检测技术可并行定性和定量分析。构成要素：固定相、流动相，载体一般原理 ：组分与固定相、流动相间的作用组分流动相固定相（载体）分离过程：先滞留、后解脱分离本质：滞留作用不同，解脱速度不同2. 层析（色谱）技术的种类（1）按操作方式柱色谱平面色谱薄层色谱纸色谱2. 层析（色谱）技术的种类（2）按流动相状态气相色谱：GSC、GLC；液相色谱：LSC、LLC；超临界流体色谱：SFC2. 层析（色谱）技术的种类（3）按分离机制吸附色谱分配色谱离子交换色谱体积排阻色谱亲和色谱电泳色谱、电色谱色谱分离机制不同，其体系构成也不同（4）色谱技术的仪器化分类3. 平面色谱（1）平面色谱的一般操作流程 （2）平面色谱的定性参数 比移值Retardation foctor Rf = L / L0可用范围：0.2～0.8最佳范围：0.3～0.5相对比移值 relative Rf Rr＝Rf（i）/Rf（s）＝Li /Ls 重现性和可比性较 Rf 好 Rf 值的意义：定性分析的指标评价展开剂选择是否合适、评价分离效果 薄层层析：Rf 0.30～0.80， △Rf ≥0.05 纸 层 析：Rf 0.05～0.85， △Rf ≥0.05（3）制板（纸）固定相的选择吸附剂溶剂载体的选择玻璃板锡箔纸滤纸 （4）样品制备与点样①点样要求：合适的溶剂 样品浓度点样量点样位置样