人转铁蛋白重组载体的构建及其表达调控的研究.pdfVIP

DOI : 10 . 13523/ j .cb . 2008S 110 中 国生物工程 杂志 ： 人转 铁 蛋 白 重 组载 体 的 构 建 及 其 表 达 调 控 的 研 究 潘 树标 颜 景 斌 任 兆 瑞 上海 交通 大 学 医 学 遗 传研究 所 卫生 部 医学胚胎 分子生 物学重 点 实验室 上 海 市胚胎 与 生殖工程 重点 实验 室 上海 摘 要 转铁蛋 白 （ 是一 种具 有重 要 生 理 功 能 的 糖 蛋 白 ， 对 它 的 开 发利 用 具 有 重 要 的 经 济和 社 会 效益 。 为 探讨 高 效表达人转铁 蛋 白 （ 的 可行性及 可 能 的 调控 机理 ， 本 文 克 隆得 到 了 兔 转铁 蛋 白 启 动 子 并 构 建 了 以 为 骨架 的 由 启 动 表达 的 重 组载 体 ， 转 染 大 鼠肝 脏 细 胞株 和 小 鼠乳腺上 皮 细胞株 细 胞 分析 了 表 达情 况 ， 并进 一 步 筛 选得 到 了 两 个稳定表达 的 细 胞 克 隆。 在 细 胞培 养液 中加 入 不 同 剂 量 的 杂 氮 胞苷 分析 甲基化修 饰 对基 因 表达 的 影 响 。 结 果显 示 兔转铁蛋 白 启 动 子 能 成功 启 动 的表达 ； 而 且 能进 一 步提 高 了 表达水平 ， 且 提高 的 程度和 的 剂 量 成 正相 关 ， 但是 不 同 克 隆 表达 升 高 程度不 一样 。 结 果说 明 的 表达 受 到 甲基化 修饰 影 响 。 关键 词 转铁蛋 白 甲基化 杂 氮胞苷 中 图分类 号 转铁 蛋 白 （ 是 种 具有重 要 生理 功 杂 氮 胞 苷 （ 是 种 甲 基 转移 酶 的 抑 制 能 的非 血红 素铁结 合糖 蛋 白 它 把 铁离 子 从 吸 收 和 剂 大量 实验证 明 可 以 降低 基 因 的 甲 基 化 水 储存 的地方 运输 到 成红 细 胞 供合 成 血 红 蛋 白 用 ， 或 输 平 从而 提 高基 因 表达 水平 。 为 了 探讨 是 送 到 机 体 的其 它 需铁部位 。 除此之 外， 还参与 呼 吸 、 否 能提高 人转铁 蛋 白 基 因 （ 的表达 能 力 ’ 本 文构 建 细胞增 殖和 免疫系 统 的 调 节 并 可 以作 为 干 细 胞 生 了 以 为 骨 架 的 由 兔 基 因 启 动 子 长 的 调节 因 子 。 主 要 在 肝 脏 、 脑 及 生 殖器 官 中 表 启 动 表 达 的表达 达 在 些 物种 的乳腺 中亦发现 有 作 的表 达 。 对 比 载体 ， 通 过 瞬 时转染大 鼠肝脏细 胞株 和 小 鼠乳 各种 物种 的 的表达水平发 现 人 表达 水平较低 ， 腺上 皮细 胞 株 中 文名 细 胞 实 验 证 明 了 载体构 特别 在乳 汁 中表达水 平