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一种适用于双向电泳的水稻磷酸化蛋白富集方法-浙江农林大学学报
ISSN 1007 -7626 中国生物化学与分子生物学报 http :/ / cjbmb . bjmu . edu . cn 20 12 11
年 月
CN 11-3870 / Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 28 (11):1057 ~ 1063
· ·
技术与方法
一种适用于双向电泳的水稻磷酸化蛋白富集方法———
酚提取法结合固相金属离子亲和层析法
1) 1) 2 ) 1) 2 )
邓湘雄 , 张晓勤 , 胡 江 , 徐祥彬 , 郭龙彪 ,
1) 1) 1) 1)*
陈慧男 , 应奇才 , 王慧中 , 薛大伟
1) 2 )
( , 3 10036 ; , 3 10006 )
杭州师范大学生命与环境科学学院 杭州 水稻生物学国家重点实验室中国水稻研究所 杭州
,
摘要 磷蛋白在植物信号传导和胁迫响应中有着非常重要的作用 磷蛋白质组学研究已经成为蛋
.
白质组学研究领域中备受瞩目的一个部分 本研究用酚提取法以水稻日本晴苗期叶片为材料提取
, 3. 5 % ; ,
叶片总蛋白 提取率达 用固相金属离子亲和层析柱纯化富集磷蛋白 得到磷蛋白占总蛋白
6. 4 % . 、 SDS, ,
约 对过柱洗涤液 不同阶段洗脱液等各个组分进行 粗略检测其蛋白含量 并根
SDS、 、
据单向 结果对总蛋白 高峰段磷蛋白 非高峰段磷蛋白以及富集后再纯化的总磷蛋白进
, . 7 cm
行双向电泳 比较其中的蛋白差异 本研究提出的方法和程序可在 聚丙烯酰胺凝胶上检测到
856 , 、 .
多达 个磷蛋白 是一种非常有效的磷蛋白富集 纯化和分离鉴定的方法
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