一种适用于双向电泳的水稻磷酸化蛋白富集方法-浙江农林大学学报.PDFVIP

一种适用于双向电泳的水稻磷酸化蛋白富集方法-浙江农林大学学报.PDF

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一种适用于双向电泳的水稻磷酸化蛋白富集方法-浙江农林大学学报

ISSN 1007 -7626 中国生物化学与分子生物学报 http :/ / cjbmb . bjmu . edu . cn 20 12 11 年 月 CN 11-3870 / Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 28 (11):1057 ~ 1063 · · 技术与方法 一种适用于双向电泳的水稻磷酸化蛋白富集方法——— 酚提取法结合固相金属离子亲和层析法 1) 1) 2 ) 1) 2 ) 邓湘雄 , 张晓勤 , 胡 江 , 徐祥彬 , 郭龙彪 , 1) 1) 1) 1)* 陈慧男 , 应奇才 , 王慧中 , 薛大伟 1) 2 ) ( , 3 10036 ; , 3 10006 ) 杭州师范大学生命与环境科学学院 杭州 水稻生物学国家重点实验室中国水稻研究所 杭州 , 摘要 磷蛋白在植物信号传导和胁迫响应中有着非常重要的作用 磷蛋白质组学研究已经成为蛋 . 白质组学研究领域中备受瞩目的一个部分 本研究用酚提取法以水稻日本晴苗期叶片为材料提取 , 3. 5 % ; , 叶片总蛋白 提取率达 用固相金属离子亲和层析柱纯化富集磷蛋白 得到磷蛋白占总蛋白 6. 4 % . 、 SDS, , 约 对过柱洗涤液 不同阶段洗脱液等各个组分进行 粗略检测其蛋白含量 并根 SDS、 、 据单向 结果对总蛋白 高峰段磷蛋白 非高峰段磷蛋白以及富集后再纯化的总磷蛋白进 , . 7 cm 行双向电泳 比较其中的蛋白差异 本研究提出的方法和程序可在 聚丙烯酰胺凝胶上检测到 856 , 、 . 多达 个磷蛋白 是一种非常有效的磷蛋白富集 纯化和分离鉴定的方法

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