DDT降解菌株KK的分离及降解特性研讨.pdf

持久性有机污染物论坛2008暨第三届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 DDT降解菌株KK的分离及降解特性研究 徐琦峰，朱鲁生}，王军，谢慧，刘伟 1．引言 DDT作为一种广谱杀虫剂，曾大量生产并广泛应用于农业、畜牧业、林业及卫生保健事业，以 致最终造成环境污染。欧美和只本等国家已在20世纪70年代禁止使用DDT，我国于1986年在农 业上全面禁止使用DDT。DDT的残留期较长，环境巾仍有大量残留【ll。近年米发现环境巾DDT含量 又有升高的趋势，认为三氯杀螨醇的使用是新的DDT输入源【21。DDT对人和动物均具有毒性，是典 型的POPs污染物之一，造成严重的牛态环境问题。因此DDT的降解备受关注，而微生物降解是有 机氯农药降解最可靠，最有效的方法。 本研究从农药厂排污口的污泥中分离到一株能够在好氧条件下降解DDT的产碱菌属菌株KK， 对其进行了16SrDNA序列的系统发育地位以及降解特性的研究，为DDT污染环境的生物修复提 供一些基础理论依据。 2．材料和方法 2．1培养基和培养条件 菌株在LB培养基中培养至对数后期，用无菌生理盐水配成一定浓度的菌悬液，待用。根据实 验需要配制一定葡萄糖浓度的培养液，并根据实验需要加入DDT，分装到试管，按1％的接种量接 种上述细菌溶液，另设置不接菌处理，设三个平行样，同时置恒温振荡培养箱于一定温度下摇床培 养。分别于第3、5、7和lO天测定DDT的剩余量。 2．2DDT的测定 采用液液萃取法，以正己烷为溶剂萃取培养液中剩余的DDT。采用气相色谱法(GC．ECD)测 定，外标法测定。气相色谱条件：Gc．14C型气相色谱仪，ECD检测器；色谱柱：OV-1701大口径毛 细管柱；温度条件：迸样口220℃，柱湿260℃，检测器260℃；不分流进样，进样量l此吲。 2．3高效降解菌KK对DDT的降解特性研究 2．3．1外加碳源浓度对降解细菌生长和降解率的影响 葡萄糖为外加碳源，浓度设定为O％、O．1％、O．3％、0．5％、1．O％、1．5％。 2．3．2初始pH值对降解细菌生长及降解率的影响 初始pH值设定为4．O、5．O、6．0、7．O、8．O、9．O、lO．O。 2．33 DDT浓度对降解细菌的生长和降解能力的影响 控制培养液中初始DDT浓度设定为l、5、lO、20mg·L．1。 2j．4培养温度对降解细菌的生长和降解能力的影响 设定振荡培养的温度设定为lO、20、30、35、40、50℃。 持久·}生有机污染物论坛2008暨第三届持久性有机污染物全国学术研讨会论文集 3．结果与分析 O O 3．1菌株l(K的生长曲线和DDT降解 O 述 曲线 锝 O 罄 喜 逝 O o 接种培养3、5、7、10d后取样测定。 0 从图l中可以看出，3d后生长量的值较低， O 而且降解率增长的趋势平缓，通过本实验 佰；2的钙％沥坫0 O 确定DDT的最佳降解时间是3d。 3 4 5 6 7 8 9 lO 时