急性髓系白血病患者FLT3表达及TKD点突变的研讨.pdfVIP

华中科技大学 硕士学位论文 急性髓系白血病患者FLT3表达及TKD点突变的研究 姓名：刘斌 申请学位级别：硕士 专业：内科学（血液病） 指导教师：陈燕 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 急性髓系白血病患者FLT3 表达及TKD 点突变的研究 硕士研究生：刘斌 指导老师：陈燕教授 华中科技大学同济医学院附属协和医院血液内科 中文摘要 目的：研究急性髓系白血病（AML ）患者与正常人FMS 样酪氨酸激酶3 （FLT3 ） 基因在骨髓单个核细胞中表达的差异，进而研究FLT3 基因酪氨酸激酶结构域（TKD ） 点突变与AML 的关系。 方法：FLT3 基因表达在骨髓单个核细胞中为 CD135 分子。将 AML 初治患者 和正常人的骨髓用红细胞裂解液处理后，再用 CD135 抗体标记，然后应用三色流式 细胞术，采用直接免疫荧光法测定并分析，比较骨髓单个核细胞中 CD135 分子表达 的差异；然后，将AML 初治患者和正常人的骨髓用淋巴细胞分离液分离出单个核细 胞后，再用Trizol 试剂提取RNA ，然后采用RT －PCR （逆转录－多聚酶联反应）结 合限制性内切酶酶切的方法，检测 30 例 AML 初治患者骨髓单个核细胞中 FLT3 基 因的TKD 点突变，并分析其与临床相关性。 结果：AML 患者骨髓单个核细胞中 CD135 阳性率总体均数的置信区间在 63.2 ％±25.4 ％之间，而正常人骨髓单个核细胞中 CD135 阳性率总体均数的置信区间在 1.13％±0.21 ％之间，二者比较表现出了明显的差异（p0.05 ）；另外，30 例AML 患 者中 3 例存在 FLT3 －TKD 点突变，阳性率为 10％，其中2 人化疗后完全缓解（缓 解率66.7 ％），其他27 例AML 患者有25 人进行了化疗，其中21 人获得了完全缓解 （缓解率84 ％），二者比较并没有统计学意义（p0.05 ）。 结论：AML 患者骨髓单个核细胞中 FLT3 基因表达显著高于正常人。AML 患 者FLT3 －TKD 点突变的阳性率为 10％左右，但是，FLT3 －TKD 点突变对患者化疗 后的完全缓解率的影响有待进一步研究。 关键词：FLT3 基因；急性髓系白血病；CD135 分子；点突变 2 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 Expression of FLT3 and point mutation in tyrosine kinase domain in acute myeloid leukemia patients Institute of Hematology Tongji Medical College Huazhong University of Science and Technology Wuhan 430022 China Master candidate: Liu Bin Tuitor: Prof. Chen Yan ABSTRACT 【Object