重组鲑鱼降钙素前体多肽的制备及其性质研究-大学化学.pdf

ISSN 中国生物化学与分子生物学报 第16卷第5期 CN 　113870Q Ch in. J. B iochem. M o l. B io l. 2000, V o l. 16, N o. 5, 650～ 654 2000年　10月 重组鲑鱼降钙素前体多肽的制备及其性质研究 刘深基　陈松森 　狄　旭　熊安琪　张友鸿 ( 中国医学科学院　中国协和医科大学　基础医学研究所, 北京　100005) 摘要　硫氧还原蛋白的第38位 突变为 的 基因在 . 21 ( 3) 中得到 M et A la T rx sCT Gly E coli BL D E 高效表达 用 T h ioB ind 亲和树脂纯化表达的融合蛋白 结果说明38位的M et 突变为A la 不影响融 合蛋白与树脂的特异性结合, 融合蛋白的纯度达90% 以上 在含有3 尿素的70% 甲酸中, 室 m o l L 温48 h , 至少80% 融合蛋白被溴化氰裂解开 采用 CM 纤维素吸附, 用稀盐酸解吸附, 得到纯度为 92% 的降钙素前体多肽 氨基酸的序列分析结构表明, 重组 的 端10个氨基酸 sCT Gly sCT Gly N 与预期一致 在强酸性条件下, 没有发生氨基酸的脱酰胺反应, 氨基酸组成分析与预期基本一致 质 谱法测定的分子量为3492, 毛细管电泳测定的等电点 为6. 46, 大鼠降钙素比活性为190 p I IU m g 左右, 与天然的人降钙素相当 关键词　重组降钙素前体, 制备, 性质 中图分类号　 57, 78 Q Q Prepara tion and Character iza tion of Recom binan t - Sa lm on Pre ca lc iton in Peptide , , , , L IU Shen ji CH EN Song sen D I Xu X ION G A n qi ZHAN G You hong (Institu te of B asic M ed ical S ciences, Ch inese A cad emy of M ed ical S ciences, P ek ing U nion M ed ical Colleg e,