红细胞压积对环孢霉素浓度检测影响研究.docVIP

精品论文 参考文献 红细胞压积对环孢霉素浓度检测影响研究 支青晏 　　（青海省妇女儿童医院检验科 810007） 　　【摘要】目的：观察和分析红细胞压积对环孢霉素浓度检测的影响。方法 将环孢霉素标准液加入到6个不同压积全血中，然后采用高效液相色谱法(HPLC)以及酶联免疫分析比色法(EMIA)来对不同红细胞压积中的环孢霉素血药浓度进行检测。结果 经过研究发现，当红细胞压积增加，则环孢霉素回收率就随之增加。结论 此次研究发现，红细胞压积对环孢霉素浓度的检测具有较大的影响。 　　【关键词】红细胞压积 环孢霉素 浓度检测 　　【中图分类号】R446.11+3 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）03-0181-01 　　目前，在器官移植术后患者中所使用的抗排斥反应免疫抑制剂主要为环孢霉素[1]。但是由于这种药物的不良反应较多，且治疗窗比较窄，口服且难以完全吸收，存在较大的个体差异性等，因此需要进行药物监测。此次研究中，此次采用高效液相色谱法(HPLC)与酶联免疫分析比色法(EMIA)来对不同红细胞压积中的环孢霉素浓度进行检测，探讨不同红细胞压积对环孢霉素浓度检测的影响，如下报道。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 此次所研究的对象为1例健康人员，年龄在25岁，时间：2014年3月。 　　1.2方法 　　仪器：高效液相色谱仪和全自动药物分析仪等。 　　环孢霉素溶液配制：采用精密称来称取0.4mg环孢霉素A粉末，将其放置到棕色带塞的洁净干燥瓶中，然后加入0.4ml甲醇进行溶解以使得其浓度达到1mg/ml，并静置1d以便其能够充分溶解。 　　标准品配制：取以上溶液50ul，然后加入950ul甲醇将其稀释为50ug/ml。 　　血液标本采集：采集70ml新鲜血液放置到250ml玻璃瓶中，每毫升血液加入2.0mgEDTA抗凝剂，并轻摇使其混匀，避免发生溶血，红细胞比容为44.4%[2]。 　　然后将以上血液分为6份，每份10ml，并分别放入到洁净的干燥瓶中，并标记好。对(A、B、C、D、E)进行离心处理离心之后，选择A、B中的上清液加入到C、D、E中，并将C、D、E中的红细胞取出放入到A、B管中，但是每管容量为10ml。在摇匀后，A、B、C、D、E、F中红细胞压积分别为65.1%、52.4%、41.2%、32.8%、27.9%、44.4%。然后将以上6管血液每份分成两小管，并放置在带赛的玻璃瓶中，每管血液为5ml。并标记为A1、A2、B1、B2、C1、C2、D1、D2、E1、E2、F1、F2。 　　选择10ml 50ug/ml的环孢霉素标准品溶液分别加入A1、B1、C1、D1、E1、F1中，使得环孢霉素A的浓度达到100ng/ml。然后加入40ml标准液到A2、B2、C2、D2、E2、F2中，使得环孢霉素A的浓度达到400ng/ml。并盖上瓶盖，轻轻摇匀，并在室温下放置一晚，然后放置到4℃冰箱中，时间为1周[3]。 　　然后采用高效液相色谱法(HPLC)以及酶联免疫分析比色法(EMIA)来对不同红细胞压积中的环孢霉素血药浓度进行检测。 　　1.3统计学方法 数据采用SPSS19.0软件处理，计量资料采用均数plusmn;标准差(xplusmn;s)表示。采用t检验，Plt;0.05具有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1酶联免疫法检测情况 　　低浓度环孢霉素A(CsA)回收率间比较(Pgt;0.05)；高浓度环孢霉素回收率间比较(Plt;0.05)。如表1。经过研究发现，当红细胞压积增加，则环孢霉素回收率就随之增加。 　　表1 酶联免疫法检测情况(x-plusmn;s) 　　 　　3 讨论 　　环孢霉素主要用于移植术后患者人群中，其的药代学较为复杂，且对不同的患者，其敏感性和耐受性也存在一定的差异性。采用不同的检测方法也可能使得环孢霉素影响因素不相同，进而对实验产生影响。 　　在人体内，环孢霉素则主要与脂蛋白相结合，当其进入到血液后，其将与血浆蛋白相互结合，并能够达到90.0%。环孢霉素与人体血浆蛋白结合率比较高，并且大多数分布在红细胞中。所以，在沉淀蛋白之前，最好是将红细胞破坏掉，进而让游离出的环孢霉素加入到沉淀液中。经过此次研究发现，当红细胞压积增加，则环孢霉素回收率就随之增加。 　　参考文献 　　[1]黄小琪,李明芬,林英辉.不同检测系统红细胞、血红蛋白及红细胞压积测定结果的可比性研究[J].现代预防医学,2011,10:1912-1914. 　　[2]李锦山,严宪才,缪英年,李亮.早期血清红细胞压积、降钙素原预测重型急性胰腺炎的临床价值[J].右江民族医学院学报,2011,