抗脑囊虫头节及囊壁鸡卵黄抗体的制备研究.pdfVIP

哈尔滨医科大学硕士学位论文 前言 随着科学技术的迅速发展，脑囊虫病的免疫诊断技术己从最开 始的由抗原检测抗体的方法向抗体检测抗原的方向发展。这就为科学 工作者提出了新的攻关课题一一如何简便、快速、高效、经济的提取 囊虫抗体。 以往许多专家和学者深入的研究了从血清中提取囊虫抗体的方 法。本次试验另辟蹊径，首次把鸡卵黄免疫球蛋白用于囊虫头节及囊 壁抗体的制备，打开了一条新的科学思路。鸡卵黄免疫球蛋白从六十 年代起受到人们的重视，随着对它的性能研究的深入，越来越受到大 家的关注，已广泛应用于各种病原微生物抗体的制备，对实验诊断技 术的发展起到了一定程度的推动作用。抗脑囊虫头节及囊壁鸡卵黄抗 体的制备为用抗体检测抗原奠定了基础，也使囊虫疫苗的制备成为可 育旨。 哈尔滨医科大学硕士学位论文 摘要 目的 研究分别利用囊虫的头节和囊壁作为抗原免疫母鸡后其蛋 黄中抗囊虫头节和囊壁IgY(YolkImmunoglobulinG)的产量并选择最 佳抗原。方法 以纯化的囊虫的头节和囊壁为抗原，免疫34周龄美国 海兰特母鸡各2。只。然后以水稀释法 W〔D)提取蛋黄中的抗体IgY,, 利用 ELISA法结合分光光度法测定两种抗体产生的O.D.值并计算阳 性率。最后检测 IgY在酸性环境下的稳定性。结果 抗囊虫头节和囊 壁IgY产生的阳性率分别为85%和65%，利用Fishe:精确概率检验法 得出P=0.2733，即两种抗体产生的阳性率无显著性差异。同时比较用 头节和囊壁抗原免疫鸡前后抗体 IgY的产生量的差别结果以O.D.值 表示，利用T-Test可得出P0.05，并证实IgY在pH4-8保持稳定。 结论 制备出了抗囊虫的头节和囊壁鸡卵黄抗体，并测定出IgY在酸 性环境下的稳定性。 关键词:囊虫;头节;囊壁 ;鸡卵黄抗体 哈尔滨医科大学硕士学位论文 Preparationofyolkimmunoglobulinagainst scolexandwallofvesicleofcysticercus [Abstract] Objective ToobserveyieldofIgYofscolexand wallofvesicleofcysticercusandchoosethebetterantigen.Methods Thepurifiedantigensofscolexandwallofvesicleofcysticercus immunized20AmericanHailanthensrespectivelyandextractedIgYfrom yolkbythemethodofwaterdilution(WD),measuringtheO.D,ofthe antibodyusingELISAandspectrophotometer.Atth气sametime,we estimatethestabilityofIgYindifferentpH Results Theproduction ofIgYofscolexandwallofvesicleofcysticercusareshowbypositive rate,whichare85%and65%.ByFisherpreciseprobabilitynumeration, Pequalto0一2733whichmeansthepositiveratesoftwokindsofIgY havenodominantdifference.CompareIgYofpre-immunizationofscolex andwallofvesiclewiththoseofpost-immunization.AccordingtoT-test, P0.05.Atthesametime,IgYisstableinacidcircumstance,especially undertheconditionofpH4一8.Conclusion Itisapracticablewayto obtainantibodiesofscolexandwallofvesicleofcysticercus.