对乙酰基偶氮羧光度法测定大豆中可溶性蛋白研究.pdfVIP

2013年 1月 食品研究与开笈 第 34卷第 2期 FoodResearchAndDeveloDment 检测分析 —=== 54 对乙酰基偶氮羧光度法测定大豆中可溶性蛋白 冯爱青 ，胡秋娈 。侯晓慧 (1．洛阳师范学院生命科学系，河南 洛阳471022；2．洛阳师范学院化学化工学院，河南 洛阳471022) 摘 要：紫红色的有机试剂对乙酰基偶氮羧在pH2．90的Britton—Robinson缓冲溶液中，能与蛋白质形成蓝色复合物， kmax为669nm，比试剂本身红移约92Ilm，表观摩尔吸光系数 ￡669 =3．09X10L／(mol·cm)，蛋 白质在 10~g／mI～ 100g／mL(BSA)范围内遵循比尔定律。0．1％的TrittonX一100存在，吸光度提高23％。探讨了反应的最佳条件，建立了 测定蛋 白质的光度分析新方法 ，用于大豆蛋白的测定，方法操作简便 ，重现性好 ，基本无干扰 。 关键词：吸光光度法；对乙酰基偶氮羧；大豆；蛋 白质 DeterminationofSolubleProteinsinSoybeanby~-Acetylearboxyazo FENGAi—qing，HUQiu-luan，HOUXiao-hui (1．DepartmentofLifeScience，LuoyangNormalUniversity，Luoyang471022，Henan，China；2．Deparmentof Chemistry，LuoyangNormalUniversity，Luoyang471022，Henan，China) Abstract：PurpleB—Acetylcarboxyazocouldcombinewithproteinform bluecomplexinBritton-Robinson bufferatpH2．90，whichpresentsamaximumabsoprtionat669am with92nm ofredshiftcomparedtoB— Acetylcarboxyazoitself．Itsapparentmolarabsoprtivityandlinearrangewere3．09~10II(mol·cm)and10tzg／mL一 100Ixg／mL (BSA)．Sensitivityincreased23％withthepresenceof0．1％ofTrittonX-100．Anewmethodofr detemr inationofsolubleproteinsinsoybeanwasestablishedundertheoptionalcondition．Themethodissimple， fast，highsensitivityandgoodreproducibility． Keywords：Spectrophotometry；p—Acetylcarb0xyazo；soybean；protein 2006年在上海召开的“中国大豆食品产业圆桌峰 蛋白质测定的光谱分析方法有直接紫外光谱法、 会议”提出了发展中国大豆产业 ，实施 “双蛋 白(大豆+ 分光光度法、荧光光度法 、共振瑞利散射光谱法等。其 牛奶)工程”振兴计划lJ【，人们对大豆蛋白的研究与开 中分光光度法具有操作简便、成本低、灵敏度高、重现 发倍加重视。大豆是最丰富、最优质的植物蛋白资源， 性好等优点网。研究发现，在pH2．90的Britton—Robinson 其水溶性蛋 白质可以被人体直接吸收利用，因此对大 缓冲介质中，紫红色的有机试剂对乙酰基偶氮羧能与 豆水溶性蛋白的研究及测定具有重要意义 。 蛋白质形成蓝色复合物，kmax669nm，该波长下的表 国内对大豆水溶性蛋白质的测定主要采用经典 观摩尔吸光系数为 3．09x10sL／(molc·m)，蛋白质在 的凯氏定氮法 ，此法操作繁杂，而且