昆虫细胞色素P450研究进展研究.pdfVIP

昆虫细胞色素P450研究进展① ② 冯纪年 田宏刚 郭付振邓雪华 (西北农林科技大学植保资源与病虫害防治教育部重点实验室， 西北农林科技大学植物保护学院，陕西 杨凌712100) ， 于动物、植物及微生物等不同生物体。昆虫P450在昆虫体内执行着许多重要的功能。本文 就昆虫P450的研究方法、多样性和同源性及与诱导相关的昆虫P450基因及其抗药性的研究 等方面的进展作一综述。 关键词：昆虫；细胞色素P450；多样性；诱导；昆虫抗药性；研究进展 素的单链蛋白质，属血红蛋白酶类，是多功能氧化酶系(MFo)的重要组成成分，存在于某 些细胞的光滑内质网上，广泛地分布于动物、植物及微生物等不同生物体¨．2J。 昆虫P450在昆虫体内执行着许多重要的功能，包括蜕皮激素和保幼激素的合成与分解、 以来，因P450与经济作物害虫和卫生昆虫的抗药性有关而引起人们的重视。由于昆虫P450 取材不易、含量低及不稳定的特点，造成对其分离纯化的极大困难，大大阻碍了人们对昆虫 P450的深入了解。随着分子生物学方法和技术的应用，昆虫P450的研究已进入基因水 平[4|。1985年，Feyereisen等从家蝇(Musea CYPl5，CYPl8，CYP28，CⅥ’29，CYP49，彻01—318， CⅥ)4，CⅥ)6，佣， CYPl2， CYP325，CYP329等29个家族【6，71，已研究的昆虫主要有家蝇(Muscadomestica)、果蝇 (Drosophilamelanogaster)、棉铃虫(Helicoverpaarmigera)及一些蚊虫等。本文就昆虫细胞色 性研究等方面的进展作一概述。 1昆虫P450研究方法 要对基因的结构功能进行研究，首先要分离出单一的目标基因。目前，昆虫P450基因 的研究主要采用免疫化学法和核酸分子杂交法。免疫化学法的基础是要有一纯化的P450蛋 白，由此制备抗体，利用抗原一抗体反应来筛选cDNA基因的表达文库。用该法已成功的分 ①西北农林科技大学重点科研项目。 ②通讯作者．jinlanf@nw日taf．edu．m。 琵虫生理生纯 2隘 矗壤)法等更新的技术在琵虫1450研究牵也有了广泛的应用。翔采用RAe飘法已从棉铃虫孛 获得CYP686、CYP687，从白纹伊蚊(Aedes CYP6N3的上游3076bp的调控穿列捧j。 2昆虫P450的多样性 2．1昆虫P450分布的多祥性 昆虫的P450分布予许多器官和组织中，但其分帮也有一定的选择性，它们主要转布于 乡}源亿舍物进入俸悫的主要入曩组缀，这壁缀织是对经霾籁表皮避入豹豁濂化合耪豹第一道 防线l引，如中肠、脂肪体、马氏管，甚至于头壳中。家蝇的腹部微粒体中P450韵含爨最高。 吴擞东等[10J研究表明，棉铃虫6龄幼虫的不同组织中P450的分布有明显熬异，在中肠中含 量最离，莲誓麟体孛次之，体壁孛最低。 2．2昆虫P450家族成爨的多样性 韶虽不清楚昆虫鳆P450基因总数到底是多少，毽可以援楚，隧蓉分子生物学技术的迅猛发 展，更多的融斑P450熬因将会被发现和鉴定‘，其总数将远远超道600个。 昆虫P450基因的多样性不仅表现在P450基因的总数上，而熙同种生物中也存在多种不 表1是虫牵缨戆色素1450基嚣举镤 种 类 已知基因 4}矜，《l，4露，4瑟，4KI 68嚣，爨蟮，9矗12 东溉飞蝗Loa／aa嘲卿附协 6Hl 北簧黑尾凤蝶Pa／／o 681，683 pD幻撕e 烟蕈天娥Mandumsea；ta 4L1，4L2，4rdl，4M2，4M3，9趁，爨醛，壁怂 蜚糠Blabems赫汹 4cI 623，9KI，9L1，12F1，12F2，12F3，12料 3昆虫戳鼬的同澈性 不同生物的P450在结构上存在较大的豢异，但火墩的证据表明，