桔汁及其饮料中果汁含量是由测定样品中所含有的钾.doc

《橙、柑、桔汁及其饮料中果汁含量的测定》------ 文摘 GB/T16771—1997 橙、柑、桔汁及其饮料中果汁含量是由测定样品中所含有的钾、总磷、氨基酸态氮、L-脯氨酸、总D-异柠檬酸和总黄酮等成分指标综合分析统计得出的。 其中总D-异柠檬酸的测定指定用罗氏（原为宝灵曼公司，现被罗氏收购）生产的D-异柠檬酸试剂盒来测定，产品编号为E0414433，目前此试剂盒由我公司在国内独家代理。 在这篇文摘中仅录入了总D-异柠檬酸的测定，其余成份的测定请参看GB/T16771—1997 附录D（标准的附录） 总D-异柠檬酸的测定 D1 方法提要 在异柠檬酸脱氢酶（ICDH）催化下，样品中的D-异柠檬酸盐与烟酰胺-腺嘌呤-双核苷酸磷酸（NADP）作用，生成NADPH的量，相当于D-异柠檬酸盐的量。在波长340nm处测定吸光度，确定样品中总D-异柠檬酸的含量。 ICDH D-异柠檬酸盐 + NADP α-氧化戊二酸盐 + NADPH + CO2 + H+ D2 试剂 本试验方法中，所用试剂均为分析纯；实验用水符合GB6682中二级水规格 D2.1 组合试剂盒（Cat No. 414433） 1号瓶：内含咪唑缓冲液（稳定剂）30ml，PH=7.1 2号瓶：内含β-烟酰胺-腺嘌呤-双核苷酸二钠45mg、硫酸锰10mg 3号瓶：内含异柠檬酸脱氢酶2mg，5（U）个活力单位。 D2.2 NADP溶液：将1号瓶内的溶液升温至20~25℃，倒入2号瓶中，使2号瓶的物质全部溶解，混合均匀。 D2.3 异柠檬酸脱氢酶溶液：用1.8ml水溶解3号瓶的物质，混合均匀。 D2.4 4mol/L氢氧化钠溶液：称取16g氢氧化钠（GB629），加水溶解，定容至100ml。 D2.5 4mol/L盐酸溶液：量取33.4mL盐酸（GB622），用水定容至100ml。 D2.6 300g/L氯化钡溶液：称取30g氯化钡（GB652），溶解于热水中，冷却后定容至100ml。 D2.7 71g/L硫酸钠溶液：称取71g无水硫酸钠（HG3—123），溶解于水中，定容至1000mL。 D2.8 缓冲溶液：称取胜2.4g三羟甲基氨甲烷和0.035g乙二胺四乙酸二钠（GB1401），用80ml水溶解。先用4mol/L盐酸调整PH=7.2左右，再用1mol/L盐酸溶液调整PH=7.0（用酸度计测定），用水定容至100mL。 D2.9 氨水（GB637） D2.10 丙酮（GB686） D3 仪器与设备 实验室常规仪器、设备及下列各项： D3.1 紫外分光光度计：带石英比色皿，光程1cm。 D3.2 酸度计：精度0.1PH单位。 D3.3 离心机：转速不低于4000r/min，离心管容积大于80mL。 D3.4 微量可调移液器： 10~50uL，允许误差（%）：±4.8； 0~1000uL，允许误差（%）：100uL，±2.0; 500uL, ±1.0; 1000uL, ±1.0。 D3.5 玻璃棒或塑料棒：自制，直径约3mm，一端带钩。 D3.6 分析天平，感量0.1mg D3.7 天平：感量10，500mg；1g。 D4 试液的制备 D4.1 果汁型碳酸饮料：称取500g样品于1000mL烧杯中，加热煮沸，在微沸状态下保持5min，并不断搅拌。待二氧化碳基本除净后冷却至室温称量。用水补足至加热前的质量，备用。 D4.2 浓缩果汁、果汁、果汁饮料、水果饮料：混匀后备用。 D5 分析步骤 D5.1 水解 按表D1规定的取样量称取试液。 浓缩汁、果汁：将试样称取在50mL烧杯中，加5mL氢氧化钠溶液（D2.4）。用玻璃棒搅拌均匀，在室温放置10min，使之水解。将溶液移入离心管（D3.3）中，用5mL盐酸溶液（D2.5）和10~20mL水，分数次洗涤烧杯，并入离心管中，使总体积约为30mL，搅拌均匀。 果汁饮料、水果饮料、果汁型碳酸饮料：将试液称取在离心管（D3.3）中，加5mL氢氧化钠溶液（D2.4），用玻璃棒搅拌均匀，在室温放置10min，使之水解。加5mL溶液（D2.5），搅拌均匀。 表D1 样品名称 水解时取样量g 比色测定时吸取量（V2）mL 浓缩果汁 2.00 0.4~0.8 果汁 10.00 0.8~1.2 含40%果汁的果汁饮料 20.00 1.5~2.0 含20%果汁的果汁饮料 25.00 2.0 含10%果汁的果汁饮料 40.0 2.0 含5%果汁的果汁饮料 60.0~80.0 2.0 含2.5%果汁的果汁型碳酸饮料 100.0~150.0 2.0 D5.2 沉淀 D5.2.1 称样量小于或等于25g的试液