流感大流行疫苗的研发.pptVIP

H5N1的重要性 对禽类和人类的高度致死性 不断地进化而传染给人 存在与健康的水禽中——随着粪便排毒 巨大的经济影响力 抗病毒药物昂贵、有限 尚无人用H5N1疫苗 应对流感大流行的研究 原型疫苗 最大限度地模拟大流行流感病毒的生物学特征 带有人类免疫空白的病毒抗原 可保护大流行流感病毒的感染 临床试验终点 观察期为56天，免疫持久性观察期为210天 在第0、14、28、42、56和210 天检测免疫效果 符合下列条件之一认为达到了第二终点： 血清阳转或血抑抗体滴度显著增高的比率 40% 几何平均滴度增加 2.5 接种疫苗42天后，血清阳转率超过70%，即HI抗体滴度不低于1：40 试验设计及分组 安全性评估 血清阳转率 血清阳转率 Thank you for your attention * 流感大流行疫苗的研发 董小平教授， 中国疾病预防控制中心 2008-11-03, 北京 H5N1基因片段分析 H5N1流感病毒HA基因变异 1群 2.1群 2.3群 2.2群 H5N1能否引起流感大流行? 形成大流行的3个要素: 1. 新病毒的出现; 2. 新病毒感染人; 3. 新病毒在人间有效传播。 大流行间歇期 大流行预警 大流行 1期: 2期: 3期: 4期: 5期: 6期: 人间无新病毒 动物病毒对人威胁较小 人间无新病毒 动物病毒对人威胁较大 出现新型人类病毒 人间传播较少或不传播 小型局部聚集病例 有限的人-人传播 大范围局部聚集病例 有限的人-人传播 在一般人群中加速和长时间传播 H5N1 现状？ ? 应对大流行 流感大流行疫苗的研发 大流行疫苗的研发 模拟大流行疫苗 NIBRG-14 (A/VietNam/1194/2004) HA, NA H5N1病毒 HA, NA 大流行流感疫苗 HA, NA 其他流感病毒 HA, NA 流感大流行 流感大流行准备 生产平台 快速通道 反向遗传 快速通道 原型疫苗 建立疫苗种子批 符合要求 1025 VE4 Ha041102 工作种子批 符合要求 70 VE3 Ha041101 主种子批 质控 数量（ml） 载体 批次 种子批名称 疫苗株NIBRG-14 来自英国NIBSC NIBRG-14 VE3 作为主种子批，VE4作为工作种子批 各种子批通过质量控制检测，包括鉴定、消毒、支原体、HA滴度、病毒滴度和外源物质。所有结果符合国家相关指南要求。 生产工艺流程 病毒扩增 接种在受精12天的鸡胚中 32℃孵育48小时 收获并灭活 (1:2000 甲醛， 7 天) 病毒纯化 超速离心浓缩 离子交换色谱纯化 分子筛色谱 浓缩液 罐装与包装 过滤与制剂 浓缩液（大批量） PanFluTM 疫苗的单一剂量毒性、异常毒性和过敏性动物实验 疫苗安全性实验 无毒 1.0 ml 皮下 肌肉 H5N1疫苗 豚鼠 刺激性 无毒 无毒 结果 0.5 ml 腹腔 H5N1疫苗 ICR小鼠 异常毒性 腹腔: 0.5 ml 肌肉: 0.2 ml 腹腔 肌肉 H5N1疫苗 ICR小鼠 单剂量毒性 剂量 接种途径 对象 动物 研究 疫苗免疫原性研究 7, 14, 21, 28 天 血液 SD小鼠, 每剂量组10至 动物 15, 10, 5, 2.5, 1.25, 0.6, 0.3 剂量 (mg/剂) Al -, Split Al -, Whole Al +, Split Al +, Whole 疫苗类型 佐剂疫苗免疫原性优于无佐剂疫苗 早期（7-14天）全病毒疫苗比裂解疫苗更早达到较高的抗体滴度 PanFluTM 根据不同剂型、剂量和接种方式下小鼠和大鼠中免疫原性检测结果，确定了用于临床试验的疫苗类型、剂量和免疫程序 用于临床研究的疫苗 免疫接种剂量: 1.25, 2.5, 5.0, 10.0 ?g/0.5 ml 疫苗剂型: 禽流感全病毒佐剂疫苗 免疫程序: 0天，28天 疫苗免疫原性研究 Preparations of 4 batches (8,000 doses) pandemic influenza vaccines 流感大流行疫苗I期临床试验 目的 首要目的 评价流感大流行原型疫苗安全性 次要目的 评价流感大流行原性疫苗免疫原性，为II期临床试验提供数据 Lancet. 2006 Sep 16;368(9540):991-7. Randomized, double blinding, controlled clinical trial, 120 subjects, age from 18-60 years old, code-breaking at Day 56. Trial starts from lowest dose group t