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磷钼蓝分光光度法测定土壤全磷
实验六 磷钼蓝分光光度法测定土壤全磷 一.实验目的 1.掌握磷钼蓝法测定磷含量的原理和实验条件； 2 .熟悉分光光度计的构造并掌握正确的使用方法 二.实验原理 土壤全磷的测定一般都采用磷钼蓝法。 在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的H2SO4和强氧化剂HClO4作用，使之完全分解，全部转化为磷酸盐而进入溶液。在一定酸度下，磷酸与钼酸铵作用生成磷钼杂多酸，以适当的还原剂将其还原成磷钼杂多蓝，使溶液呈蓝色，蓝色的深浅与磷的含量成正比，可用分光光度法测定。 三.仪器和试剂 仪器： 分析天平 ， 分光光度计 ， 50mL容量瓶 ， 100mL容量瓶 ， 10mL吸量管 ， 5mL移液管 ，10mL量筒 ， 50mL锥型瓶 ， 无磷滤纸 ， 小漏斗 试剂： 1.浓H2SO4 2.70%-72%HClO4 3.钼锑储存液 4.钼锑抗显色剂 5.0.2%二硝基酚指示剂 6.磷标准溶液（ρ=5.00μg/mL) 四.操作步骤 1.待测液的制备 2.工作曲线的绘制及待测液吸光度的测定 1.待测液的制备 准确称取通过100目筛的烘干土壤试样约1.0g于50mL锥行瓶中，以少量蒸馏水润湿，加入8mL浓H2SO4，摇动（最好放置过夜），再加入70%-72%的HClO410滴，摇匀，瓶口上放一小漏斗，慢慢加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20min,全部消煮时间约40-60 min。冷却后，用干燥漏斗和无磷滤纸将消煮液滤人100mL容量瓶中，用少量蒸馏水重复淋洗，保证定量转移完全，用蒸馏水稀释至刻度，备用。 2.工作曲线的绘制及待测液吸光度的测定 分别准确移取5.00μg . mL-1磷标准0.00,1.00,2.00, 3.00, 4.00,5.00, 6.00 mL于7只编号的50mL容量瓶中，再准确移取5.00mL待测液（可根据土壤试样中磷含量的多少来确定应该吸取待测液的体积）于8号容量瓶中，分别加蒸馏水稀释至约30mL,加二硝基酚指示剂2滴，用稀NaOH溶液和稀H2SO4溶液调节pH至溶液刚呈微黄色， *化 学 实 验 * 磷钼蓝法常用的还原剂有很多，本实验采用在酒石酸锑钾的存在下，用抗坏血酸作还原剂，将磷钼杂多酸还原为磷钼杂多蓝，常称为“钼锑抗”（钼酸铵-酒石酸锑钾-抗坏血酸试剂的简称）法。此法手续简便，颜色稳定，干扰离子允许量大，很适于进行土壤中磷的测定。 钼锑抗法要求显色温度为15-60℃，颜色在8h内可保持稳定。要求显色酸度为0.45-0.65mol/L,若酸度太小，磷钼蓝稳定时间较短；若酸度过大，则显色变慢。
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