2017-2018学年高中生物 微生物的培养与应用 2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件 新人教版选修.pptVIP

类型一 类型二 类型三 类型二　微生物的分离与计数 【例2】 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。 实验步骤: (1)制备稀释倍数为102,103,104,105,106的系列稀释液; (2)为了得到更加准确的结果,你选用　　　　　　　　　　　法接种样品;? (3)适宜温度下培养。 类型一 类型二 类型三 结果分析: (1)测定大肠杆菌数目时,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确可信的是　　　　,其理由是　??　;? A.一个平板,统计的菌落数数值是230 B.两个平板,统计的菌落数数值是220和260,取平均值240 C.三个平板,统计的菌落数数值分别是210、50和520,取平均值260 D.三个平板,统计的菌落数数值分别是230、240和250,取平均值240 (2)用这种方法测定的大肠杆菌密度比实际活菌数量要　　　　　,因为　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。? 类型一 类型二 类型三 解析:稀释涂布平板法可以统计样品中的活菌数目。(1)在同一稀释度下,选取多个菌落数相差不大的平行组平板进行计数,取其平均值。(2)因为一个菌落可能由两个或多个细菌连在一起生长而成,所以实际活菌数量要比测得的数量多。 答案:实验步骤:(2)稀释涂布平板 结果分析:(1)D　在设计实验时,在同一个稀释度下,一定要涂布至少三个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性;在分析实验结果时,要考虑所设置的重复组的结果是否相当 (2)少　当两个或多个细菌连在一起时,平板上观察到的是一个菌落 类型一 类型二 类型三 变式训练2 下面是探究如何从土壤中分离自生固氮菌与计数的实验。 【实验原理】 农田的表层土壤中,自生固氮菌的含量比较多。将用表土制成的稀泥浆,接种到无氮培养基上进行培养,在这种情况下,只有自生固氮菌才能生长繁殖,用这种方法,可以将自生固氮菌与其他细菌分离开来。 【材料用具】 农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。 类型一 类型二 类型三 【方法步骤】 (1)倒平板。分别将无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板,应在　　　　　　　　　　　　操作。? (2)制备土壤稀释液。取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀,用无菌吸管吸取上清液1 mL,转至9 mL的无菌水的大试管中,依次稀释到107倍稀释度。 (3)涂布。按照由101~108倍稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布　　　个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布　　　个。? 类型一 类型二 类型三 (4)培养。放入恒温箱内,在28~30 ℃下培养3~4 d。 (5)细菌的计数。当菌落数目稳定时,选取菌落数在　　　　　　　　的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌落数是(稀释度是105倍)　　　　　　　　　个。? 【预期结果】 相同稀释度下,牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数　　　　(填“多于”或“少于”)无氮培养基上的数目。原因是　??　。? 类型一 类型二 类型三 解析:方法步骤:(1)倒平板应在酒精灯火焰旁进行,防止杂菌污染。(3)按照由101~108倍稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布,每个稀释度下,无氮培养基应至少涂布3个平板,牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个平板作为对照。(5)当菌落数目稳定时,选取菌落数在30~300的平板进行计数。如果测试的平均值为50,则每克样品中的菌落数是(稀释度是105倍)50×105÷0.1=5×107(个)。预期结果:牛肉膏蛋白胨平板上的菌落数多于无氮培养基上的数目。原因是无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存。 答案:方法步骤:(1)酒精灯火焰旁 (3)3　1 (5)30~300　5×107 预期结果:多于　无氮培养基上能生存繁殖的仅是土壤中的固氮菌,而牛肉膏蛋白胨培养基上几乎允许土壤中所有菌类生存 类型一 类型二 类型三 类型三　实验设计与操作 【例3】 在现代农业中,常在饲料中加入一定量的尿素饲养牛等牲畜,因其有特殊的器官——瘤胃,在瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物以尿素为唯一氮源。某同学设计了如下实验,对能分解尿素的细菌进行分离和计数。 ①取样。到屠宰场从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,将样品装入事先准备好的锥形瓶中密封。 ②制备培养基。制备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基(相同的接种、培养条件下,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数应明显多于选择培