舒洛地特对糖尿病大鼠的肾脏保护作用.pdfVIP

《沈阳部队医药》 o9卷 第。期 ~ 5flJ · 172 · 舒洛地特对糖尿病大鼠的肾脏保护作用 徐海平 ‘郑红光 摘要 为探讨舒洛地特对糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋 白酶一9(MMP一9)、基质金属蛋 白酶抑制物一I (TIMP一1)表达的影响，将 SD雄性大鼠20只腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)建立早期糖尿病肾病模型，随机分为 糖尿病肾病组 (DN组)、糖尿病肾病治疗组 (DNS组)，各 10只，另有 1O只为正常对照组 (C组)。DNS组予以 舒洛地特 (10mg·kg d )肌肉注射。8周后，检测各组大鼠的24h尿白蛋白定量、体重、肾重、肾肥大指数、血 糖、血尿素、血肌酐；通过免疫组化及Westernblot观察肾MMP一9和TIMP一1的蛋白表达。结果表明，DN组大 鼠的24h尿白蛋白定量、肾脏肥大指数在糖尿病早期较C组明显增加，而DNS组大鼠较 DN组明显减少 (均为 P0．01)。DN组大鼠MMP一9、TIMP一1表达较 C组明显增加，DNS组较DN组明显减弱 (P0．01)，但 MMP 一 9／TIMP一1的比值在 DN组减少 ，DNS组升高(均为P0．01)。结论：早期应用舒洛地特可降低24h尿白蛋 白，抑制糖尿病大鼠早期肾脏肥大，抑制MMP一9、TIMP一1表达，改善 MMP一9／TIMP一1比例失衡。 关键词 舒洛地特 肾病，糖尿病 基质金属蛋白酶一9 基质金属蛋白酶抑制物一1 大鼠 糖尿病肾病 (diabeticnephropathy，DN)发病 分为糖尿病肾病组(DN组)和糖尿病肾病舒洛地 率高，治疗困难，疗效差，危害极大。国外临床及 特治疗组 (DNS组)，各 lO只。DNS组给予舒洛 实验室的结果表明，舒洛地特(sulodexide)对 DN 地特10mg·kg d 肌肉注射8周。实验期间， 有保护作用，可减少蛋 白尿，保护肾功能，但其确 保持室温 18～20℃，湿度69％，12h交替照明。 切机制尚不清楚。基质金属蛋 白 基质金属蛋 大鼠自由饮水、进食，未使用胰岛素及其它降糖 白酶抑制物 (MMPs／TIMPs)系统失衡是导致细胞 药。 外基质 (ECM)积聚，DN发生发展的重要机制。 1．324h尿微量白蛋 白测定 实验结束前48h代 有研究报道高血糖可直接上调TIMPs表达，抑制 谢笼收集24h尿液，计24h尿量。按照试剂盒说 MMPs活性…。本研究拟在MMP一9／TIMP一1水 明书，采用酶联免疫吸附法检测 白蛋白含量。 平进一步探讨舒洛地特治疗 DN的作用机制，为 1．4血生化指标测定 内眦取血1ml放人 EP管 防治DN提供一定的理论指导。 中，以3000r／min离心5rain后将 血清移人另一 EP管中，采用 日立7020生化分析仪检测血糖、血 1 材料与方法 肌酐、血尿素氮。 1．1主要试剂和仪器 链脲佐菌素 (streptozoto— 1．5计算 肾脏肥大指数 大鼠处死前称体重 cin，STZ，Sigma)；酶联免疫吸附法测试大鼠尿微 (bodyweight，BW)；以 0．3％戊 巴比妥钠按 量白蛋 白试剂盒(ADL公司)；日立 7020生化分 35mg／kg腹腔注射麻醉，取双侧肾脏，分别称肾重 析仪；兔抗MMP一9、TIMP一1抗体 (武汉博士德 (kidneyweight，KW)，按下式计算肾脏肥大指数 生物有限公司)；抗体稀释液 (DAKO公司)；En = [KW(g)／BW(g)]×1000。 Vision免疫组化试剂盒 (广州基因有限公司)； 1．6肾脏病理检查 大体标本观察。光镜观察： BCA试剂盒(美 国PIE