罗布麻叶对尿液内源性物质代谢影响的大鼠实验研究.docVIP

精品论文 参考文献 罗布麻叶对尿液内源性物质代谢影响的大鼠实验研究 郝秀清 　　（内蒙古乌兰察布医学高等专科学校 内蒙古乌兰察布 012000） 　　【摘要】目的：实验分析罗布麻叶对大鼠尿液内源性物质代谢的影响作用。方法：将12只大鼠分成三组，分别为空白对照组、罗布麻叶高剂量组以及罗布麻叶低剂量组，提取罗布麻叶对三组大鼠连续给药，之后对三组大鼠尿液中的内源性物质代谢水平对比分析。结果：空白对照组和罗布麻叶给药组均有显著得分点区分效果，其中在对三组大鼠连续给药22d，和罗布麻叶低剂量组相比，空白对照组和罗布麻叶高剂量足差异显著。结论：罗布麻叶对大鼠尿液内源性物质代谢具有直接影响，可为临床提供一定参考资料。 　　【关键词】罗布麻叶；尿液；内源性物质代谢；大鼠实验 　　【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）19-0068-02 　　罗布麻是一种生长在盐碱、沙荒地区的宿根资源植物，在药理研究中称其具有保护肝脏、降血脂、抗抑郁、抗氧化以及调节血压等作用。在罗布麻叶黄酮类成分初步提取、纯化工艺中，初步鉴定其主要含有金丝桃苷、异槲皮素、三叶豆苷以及槲皮素等等，同时也发现其对高胆固醇大鼠模型血脂有显著降低作用。为进一步详细了解罗布麻叶的临床影响作用，本文则以12只大鼠为例，探讨罗布麻叶对尿液内源性物质代谢的影响作用，具体研究结果如下： 　　1.资料和方法 　　1.1 一般资料 　　将12只大鼠分成三组，分别为空白对照组、罗布麻叶高剂量组以及罗布麻叶低剂量组，每组4只，所有大鼠均为雄性大鼠，体质量在150～200g，来源为武汉大学动物实验中心，合格证号为SCXK（颚）：2008-0004. 　　本次试验所采用的罗布麻叶均是从湖北天济中药饮片有限公司购买，生产地为吉林，经过鉴定确定为夹竹桃科茶叶花术罗布麻干燥液。其中在本次试验所采用的乙酸为美国Fisher公司生产，甲醇为美国TEDIA公司生产，乙腈为美国Merck公司生产，乙醇为分析纯所得，所采用的蒸馏水为自制产品。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1药物制备 将本次实验所用干燥罗布麻叶称取300g，将70%乙醇以10倍量加入其中，之后对其实施3次回流提取，2h/次，进行过滤并将3次的提取物进行合并，实施减压乙醇回收，在将其实施浓缩达到一定体积之后将其进行冷冻和干燥，最后所得物经过称重为73.85g。 　　1.2.2动物实验 其中罗布麻叶高剂量组和低剂量组两组大鼠，给药剂量分别为700mg?kg-1和175mg?kg-1，两组给药浓度为70mg?kg-1和17.5mg?kg-1，给药方式为灌胃给药，每次给药体积为2ml，1次/d，对其连续给药29d。空白对照组大鼠只是给予2ml生理盐水/d即可。 　　2.结果 　　2.1 数据处理 　　本次色谱条件分别为：采用的色谱柱为Venusil MP-C18，流动相则为两组，其中A组为乙腈，B组为0.1%甲酸水溶液，流速和柱温分别设定为0.5ml?min-1和35℃。本次梯度洗脱条件则如表1所示。本次质谱条件分别为：毛细管电压4000V，干燥气流速度设定为：10L?min-1，温度设定为35℃，雾化器压力设定为40psi。尿液总离子瘤色谱图采用全扫描检测得到，并将之中的质谱信息提取出来，最终得出尿液物质荷比。在经过峰匹配以及峰识别对本次数据实施处理之后，将其采用Excel格式进行保存，便于进行下一次分析研究。本次研究所得到的数据全部都导入SIMCA-P软件实施统一分析，数据实施有监督模式识别方法偏最小二乘法判别分析（PLS-DA）以及无监督模式识别方法主成分分析法（PCA）。三组大鼠之间的尿液内源性物质代谢差异可以通过得分图（Scores Plot）显示出来。 　　 　　2.结果 　　在得分图像显示中，每个点的坐标均能够将该样本的主成分1和主成分2关系表示出来，其中横坐标表示的是主成分t1，纵坐标则表示的是t2。通过SOMCA-P软件立体三维得分图，能够将前三个主成分之间关系表示出来，如果样本之间的差异较为明显的话，在得分图上的显示则为两个点位置差距比较远，反之则较近。 　　其中在其得分图像上选取10个样本点，各个点所代表的均是每个组之间的均值，样本点的选取则是从不同时间点中得出。从得分图上可以明确看出，每个时间点各个组之间的均值得分均能够表示出罗布麻叶醇提取物对尿液中内源性物质代谢所具有的影响作用。之间距离越大则代表之间差异也越大，也就能够表示大鼠尿液内源性物质代谢具有较大差异。因此从得分图可以看出本次研究结果：空白对照组和罗布麻叶给药组均有显著得分点区分效果，其中在对三组大鼠连续给药22d，和罗布麻叶低剂量组相比