药品项目实施技术总结报告.doc

贯叶金丝桃有效成分纯化及抗肿瘤新药研制开发 项目实施技术总结报告 第一部分 金丝桃素的提取与纯化 二、具体实施方案和结果 第一章 绪论 1.1 金丝桃素的研究开发进展 金丝桃素属于萘骈二蒽酮类化合物，主要存在于藤黄科金丝桃属植物中，其中以贯叶连翘的应用最为广泛。我国民间常将贯叶连翘全草鲜品捣烂或干品敷患处，治创伤出血、痛疖肿毒和烧烫伤等近年来，国内外大量的报道表明贯叶连翘具有多种药理作用，目前成为新的抗肿瘤、抗以及抗抑郁药物的开发热点之一。贯叶连翘Hypericum perforatum L.），又名贯叶金丝桃，为藤黄科Garcinia） 金丝桃属Hypericaceae）植物，多年生草本[1]。 这种植物通常在每年6月24日前后开花，花瓣呈黄色。由于该日是圣经记载中施洗者圣约翰的诞生日期，且这植物含有红色液汁，当时的人们认为这是圣约翰殉道时流出的血液，为此人们认为这种植物具有神奇的力量，因此在欧洲以及美国等地贯叶连翘通常被称为圣约翰草St. John’s Wort）[2]。中古时代的人们相信圣约翰草有医疗作用和驱走邪魔的作用。 贯叶连翘高20～60厘米，茎直立，多分枝，茎及分枝两侧各有一纵线棱。单叶生，叶无柄，彼此靠近密集，椭圆形至线形，长1～2厘米，宽0.3～0.7厘米，背卷，上面绿色，下面白绿色，全面散布透明或黑色的腺点，黑色腺点大多分布于叶片边缘或近顶端。花序为聚伞状花序，生于茎及分枝两端。花瓣黄色，花萼、花瓣各五片，长圆形或披针形，边缘有黑色腺点，雄蕊多数，合生为三束，气微，味微苦涩。蒴果卵珠形，长约5毫米，宽3毫米，具背生腺条及侧生黄褐色囊状腺体。种子黑褐色，圆柱形，长约1毫米，花期7-8月，果期9-10月。其形态见图1-1 图1-1 贯叶连翘植株形态 Fig.1-1 The Shape of Hypericum perforatum L. 贯叶连翘生长于海拔800-2100米的山地灌丛、草丛及路旁，喜温暖、湿润的环境，耐寒。贯叶连翘属温带植物，分布范围很广，国外主要分布与于南欧、非洲西北部、近东、中亚、印度、蒙古、前苏联等，国内产于山东、河南、河北、陕西、山西、甘肃、新疆、江西、江苏、四川、湖南、湖北、贵州等地。 1.1.1.2 贯叶连翘的化学成分 由于贯叶连翘具有重要的药理作用，故其化学成分的研究也一直是热点，国内外学者对此进行了大量的研究。贯叶连翘的主要化学成分已被分离鉴定，一般认为其主要成分包括：黄酮类化合物（flavonol glycosides）、萘骈二蒽酮类化合物（naphtodianthrones）、间苯三酚衍生物（pholoroglucinols derivatives）、挥发油以及有机酸等其它成分[4]。 （1）萘骈二蒽酮类化合物 目前研究表明，贯叶连翘中萘骈二蒽酮类化合物主要有伪金丝桃素（Pseudohypericin）、金丝桃素（Hypericin）,分子结构式见图 1-2[5]。，是金丝桃属植物的特征成分，主要存在于花和芽中，在贯叶连翘中的含量一般为万分之几。在花瓣中金丝桃素的含量最高，达0.245％，伪金丝桃素的含量是金丝桃素的2～4倍[6]。 图1-2 贯叶连翘中萘骈二蒽酮类化合物分子结构式 Fig.1-2 Molecular Structure of Naphtodianthrones in Hypericum Perforatum L. 鲜植物中还含有原金丝桃素（Protohypericin）以及原伪金丝桃素（Protopseudohypericin），光照后即分别转化为金丝桃素和伪金丝桃素。萘骈二蒽酮类化合物具有活跃的电子共轭体系，遇光易氧化，对热不够稳定。接触皮肤、粘膜或大剂量摄入体内，易引起人和动物的光敏反应。植物中还存在伪金丝桃素的氧化产物环伪金丝桃素（Cyclopseudohypericin）。 （2）黄酮类化合物 目前研究表明贯叶连翘中的黄酮类化合物主要有芦丁（Rutin）、金丝桃苷（Hyeroside）、异槲皮苷（Isoquercitrin）、槲皮苷（Quercitrin）、槲皮素（Quercetin）等，分子结构式见图1-3[7,8]。 图1-3 贯叶连翘中黄酮类化合物分子结构图Fig.1-3 Molecular Structure of Flavonol glycosides in Hypericum perforatum L 黄酮类化合物的含量在发芽期和开花前最高，达11.7％，其次为叶和茎，含量为7.4％。花中金丝桃苷的含量最高，为3％，其次为叶，含量为1.05％～1.8％。叶和花中含有槲皮素0.1％～0.582％。植株的所有部位皆含有芦丁，发芽期叶中的含量为2％，高于花中含量（0.095％）。干燥植物地上部分含原花青素(其中包括二聚体、三聚体和四聚体