原发性帕金森病发病机制中α突触核蛋白酪氨酸羟化酶的分子间相互作用研讨.pdf

缩 略 语 Apro:Aprotinin,aserineproteaseinhibitorthatinhibitstrypsin,chymotrypsin,kallikreinand plasmin BSA BovineSerumAlbumin by basepair cDNA complementarydeoxyribonucleicacid RDTA: Ethyl-diamine-tetraacetaticacid GFP GreenFluorescentprotein h hour His histidine HPLC HighPerformanceLiquidChromatography kD kiloDaltor IPTG Isopropyl-D-thiogalactoside(异丙基一D-硫代半乳糖昔) L-DA L-D叩armne L-3,4-Dihydroxyphenylalanine mouseTH mniide molecularweight NonAmyloid-betaComponentPrecursor.Itisabynameofthea-synuclein,andwas firstreportedbyK.Uedain199341. Polyacrylamidegelelectrophoresis PRS phosphatebufferedsaline PCR PolymeraseChainReaction PD Parkinsonsdisease PMSF Phenylmethanesulfonylfluoride,itinhibitsserineproteasessuchastrypsinand chymotrypsin.Alsoinhibitscysteineproteasesandacetylcholinesterase Pure: Puromyc工n,3’一[a-Amino一methoxyhydrocinnamamido]-3-deoxy- N,N-dimethyladenosine,itisanucleosideantibiotic,proteinsynthesisinhibitorthat causesprematurechainterminationbyactingasananalogofthe3terminalendof aminoacyl-tRNA nnTH: recombinantmouseTE Rr reversetransenptase second SDS: Sodiumdodecyl Polyacrylamidegelelectrophoresis TH TyrosineHydroxylase U unit UV: ultraviolet 中文摘要 帕金森氏病 (Parkinsonsdisease,PD)是一种常见的中老年人神经系统变 性疾病，其病因和发病机制至今不明。帕金森氏病的神经化学异常是黑质的多巴 胺能神经元的变性，由此导致纹状体多巴胺水平降低，而酪氨酸轻化酶(Tyrosine Hydroxlase,TH)催化L一多巴的生成，是多巴胺生物合成途径的关键酶。 a-突触核蛋白(a-synuclein)的基因突变与家族性帕金森氏病发病有关， 而且。一突触核蛋白存在于所有PD患者脑中的路易小体中，对于其功能的研究是 当前神经科学的热点。虽然a一突触核蛋白和酪氨酸)t}化酶是从不同角度相关于帕 金森氏病，但它们同属细胞质内蛋白质，可能存在着内在的联系。 我们原核表达和纯化了a一突触核蛋白和酪氨酸经化酶;用免疫共沉淀和双向 Westernblotting检测了人脑路易小体中。一突触核蛋白的磷酸化情况;通过共同保 温孵育及活性鉴定的方法来观察a一突触核蛋白和酪氨酸轻化酶的相互作用情况， 得到了