弓形体急性感染与小鼠妊娠失败相关性研讨.pdf

弓形体急性感染与小鼠妊娠失败相关性研究’ 钟秀会1 宫新城1 史万玉1 刘占民1 翟向和1 张铁1倪耀娣1 邓淑慧2 (1．河北农业大学动科院河北保定071001；2．保定市膏牧局) 摘要：本试验研究了弓形体感染对小鼠妊娠的影响。用免疫组织化学方法测定子宫部分免疫细胞， 用酶联吸附免疫法测定子宫匀浆中肿瘤坏死因子·n和白介素·10的fllt。发现妊od和妊6d接种弓形体， 小鼠全部流产．感染组子宫内膜中仅见少量CD8+T淋巴细胞。对照组未见阳性细胞。F4780+巨噬细胞在 感染组小鼠子宫内膜中大量存在。对照组仅见少量F4tS0+细胞。细胞因子测定结果表明，肿瘤坏死因子 ．a(TNF-d)弓形体感染组子宫匀浆中含量高达76．682__．30．354 pg／mg蛋白，显著高于正常妊娠7d小鼠 子宫中TNF-n的含量(P如．01)。结果提示，已妊娠母鼠感染弓形体可引发流产，并与子宫胎儿界面的 TNF-a分泌增多有关。妊0d感染。孕鼠子宫匀浆上清液中IL-10舍量平均值为19．656±9．II pg／mg蛋白， 见统计差异(P0．05)。 美■调：弓形体感染；小鼠妊娠失败；出既 弓形体感染刺激NK细胞杀伤活性Ⅲ。导致小鼠妊娠失败o’。在家畜，弓形体感染常 引起绵羊和山羊流产睁”。Dubey等人调查了美国中北部地区羊流产情况，1201头流产的 胎儿和死胎中。17．5％患弓形体病。弓形体抗体阳性者占20．9％f41。在牛，可能由弓形体 引起的流产并不像羊那么严重，但也需要进一步研究嘲。在人类，弓形体感染可引起致命 的弓形体脑炎”J，或干扰正常妊娠”J。 限于子宫取材的诸多不便，研究弓形体对妊娠的影响及有关机体抗弓形体免疫反应机 理多选小鼠来试验。已有资料指出，弓形体感染会诱发机体免疫系统产生I131反应，因而 影响正常妊娠9】。Luft等研究发现，妊娠抑制了弓形体刺激NK细胞活性的能力”】。这提 示妊娠时，NK细胞处于抑制状态。母鼠先感染弓形体再妊娠，则多数孕鼠流产。并且感 染母鼠一个月内不发情8】。这表明Thl免疫反应占主导地位的情况下，母体不能正常启动 Th2免疫反应，使胚胎着床失败。抗利什曼原虫(Leishmania major)感染使母鼠产生Thl 合成量下降，因而胚胎吸收率和着床失败率均上升“oJ。 对弓形体的免疫试验研究表明，Y．干扰素(IFN—y)对抗弓形体免疫起着至关重要的 作用”“”J。IFN—Y受体缺乏的小鼠，接种低剂量的弓形体，10d内便发生死亡，而且巨噬 细胞活化程度(表达MHCII类抗原)很低，肿瘤坏死因子．a(TNF-a)、诱导型一氧化 B(IL-l 8 氮合酶(iNOS)、白细胞介素-IB)等这些巨噬细胞产物也减量“”。YT细胞参 与急性感染期免疫反应。溶解被弓形体感染的巨噬细胞“”。除巨噬细胞“2。”1以外．NK细 19] ·国家自然科学基金资助(No ·283· IL-15…1，m4””等均参与抗弓形体免疫。 虽有资料介绍，弓形体感染可诱发体内Thl免疫反应，导致妊娠失败9】，但迄今尚未 见到直接观察弓形体感染影响妊娠成败过程中，子宫局部免疫调节水平变化的资料。Stahl 等人曾研究，小鼠感染弓形体1～2个月后(慢性阶段)配种，大多数孕鼠均发生妊娠失 败”1。他们对感染弓形体慢性阶段母鼠的卵巢结构、子宫重量等进行了观察，但未涉及子 宫免疫细胞和细胞因子的变化。 本研究用低剂量的弓形体感染昆明小鼠 观察了急性感染阶段小鼠子宫细胞免疫水平 和细胞因子含量变化与妊娠之间的相互影响 证明弓形体感染能够诱发母体的Thl细胞因 子反应，导致妊娠失败。 1材料和方法 1．1试验动物