江苏省南京市高中生物第一章基因工程1.1.1基因工程概述导学案无答案苏教版选修.docVIP

第一节 基因工程概述 【课标要求】 简述基因工程的诞生 简述基因工程的原理及技术 举例说出基因工程的应用 【教学目标】 1.简述基因工程所需3种基本工具的使用。 2.学习运用知识解决相关问题的能力。 3.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。 【教学过程】 知识点一、基因工程的诞生和发展 （一）诞生和发展 理论铺垫：艾弗里证明了 ；沃森和克里克阐明了 ； 尼伦贝格等 （二）基因工程的概念 基因工程是指在 通过人工“ ”和“ ”等方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入 并使重组基因在 中表达，产生 。包括 、 以及 。 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 二、基因工程的工具———酶与载体 1、限制性核酸内切酶———“分子手术刀” （1）这类酶在生物体内能将外来的DNA切断，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保持细胞原有的遗传信息。 （2）由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性核酸内切酶（简称_______）。 （3）DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段，末端通常有两种形式，即 和 。 【例1】下列关于限制酶的说法正确的是（ ） A.限制酶广泛存在于各种生物中，但微生物中很少 B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键 2、DNA连接酶——“分子缝合针” 拓展：根据DNA连接酶的来源不同，可以将它分为两类：一类是从大肠杆菌中分离得到 的，称为Ecoli DNA连接酶。Ecoli DNA连接酶只能将双链DNA片段互补的黏性末端 之间连接起来，不能将双链DNA片段平口末端之间进行连接。另一类是从T4噬菌体中分 离出来的，称为T4DNA连接酶。T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末 端，又可以“缝合”双链DNA片段的平口末端，但连接平口末端之间的效率比较低。 【例2】下图为DNA分子的切割和连接过程。 (1)EcoRI是一种 酶，其识别序列是 ，切割位点是 与 之间的 键。切割结果产生的DNA片段末端形式为 。 (2)不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶应是 连接酶，此酶的作用是在 与 之间形成 键，而起“缝合”作用的。还有一种连接平口末端的连接酶是 。 3、载体——“分子运输车” （1）基因操作过程中使用载体两个目的：一是用它作为运载工具，将目的基因转移到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制。 （2）现在通常使用的载体是 ，它是一种相对分子质量较小、独立于拟核DNA之外的环状_______，有的细菌中有一个，有的细菌中有多个。 （3）质粒通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移，可以 复制，也可整合细菌拟核DNA中，随着拟核DNA的复制而复制。 （4）其他载体还有 和 等。 （5）作为载体必须具备以下条件： 能够在宿主细胞中复制并稳定地保存，具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接；具有某些标记基因，便于进行筛选，如对抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 【例3】以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，分析回答问题。 (1)其中①和 是由一种限制酶切割形成的 末端，两者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是 。 (2) 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端，两者要形成重组DNA片段，所用DNA连接酶通常是 。 【例4】图示限制酶切割某DNA分子的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列 A．CTTAAG B．CUUAAG C．GAATTC D．GAAUUC 三、基因工程的一般过程与技术 1、获取目的基因 有两条途径：直接分离和人工合成。 2、制备重组DNA分子 用 酶处理目的基因和运载体，而后加入DNA连接酶，使目的基因载入到运载体中，形成 。 3、转化受体细胞 重组DNA导入受体细胞。 基因工程中常用的受