生化课件(王镜岩版)第7章 酶通论.ppt

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生化课件(王镜岩版)第7章 酶通论

酶促反应:E + S === ES === ES? ? ?? EP ?? E + P 反应方向, 即化学平衡方向,主要取决于反应自由能变化?H?。 而反应速度快慢,则主要取决于反应的活化能Ea。 催化剂的作用是降低反应活化能Ea,从而起到提高反应速度的作用? 2. 活化能降低 四、酶的结构及催化作用机制 (四)酶作用高效率的机制 反应过程中能的变化 酶催化作用的本质是酶的活性中心与底物分子通过短程非共价力(如氢键,离子键和疏水键等)的作用,形成E-S反应中间物, 其结果使底物的价键状态发生形变或极化,起到激活底物分子和降低过渡态活化能作用。 五、酶活力的测定和分离纯化 1、酶活力与酶反应速度: 活力越高,酶催化的反应速度越快 2、Enzyme的活力单位(U,active unit) 1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位,是指在特定条件下(温度为25°C,pH及底物浓度等均为最适条件),在1分钟内能转化1微摩尔 (μ mol) 底物的酶量,或是转化底物中1微摩尔的有关基团的酶量。 3、Enzyme的比活力(specific activity) 比活力的大小,也就是酶含量的大小,即每毫克蛋白所具有的酶活力,一般用“单位/毫克蛋白(U/mg)”来表示。 (一)Enzyme活力的测定 Enzyme的分离提纯 1、 选材; 2、破碎; 3、抽提; 4、分离及提纯; 5、结晶; 6、保存。 整个过程注意酶蛋白的变性与失活。 五、酶活力的测定和分离纯化 (二)Enzyme分离和纯化 六、核酶(339页) 核酶(Ribozyme) Cech 和Altman发现核酸分子也有酶活性,从根本上改变了以往认为只有蛋白质才具有催化功能的概念。由此, Cech 和Altman获得了1989年的诺贝尔化学奖。 意义:1、作为RNA的限制性内切酶 2、作为抗病因子 3、生命起源的探索 七、抗体酶 抗体酶(Abzyme) 1986年美国《Science》周刊发表了来自Lerner和Schultz的有关具有酶催化性质的抗体研究报告。 意义:利用抗体酶专一性地破坏病毒蛋白质以及清除体内“垃圾”如血管凝快等。还可用于可卡因吸毒患者的治疗和减轻癌症治疗的副作用。在制药工业,立体专一性的抗体酶有助于解决令人头痛的对映体拆分的难题 Chapter8 酶通论 一、酶的特性 (一)什么是酶? 酶是活细胞产生的一类具有催化功能的生物分子,所以又称为生物催化剂Biocatalysts 。 绝大多数的酶都是蛋白质。 酶催化的生物化学反应,称为酶促反应Enzymatic reaction。 在酶的催化下发生化学变化的物质,称为底物substrate。 (二)酶和一般催化剂的共性 1,用量少而催化效率高; 2,它能够改变化学反应的速度,但是不能改变化学反应平衡。 3,酶能够稳定底物形成的过渡状态,降低反应的活化能,从而加速反应的进行。 一、酶的特性 (三)酶催化作用特性:高效率、专一性、可调控 酶的催化作用可使反应速度提高106 -1012倍。 例如:过氧化氢分解 2H2O2 2H2O + O2 用Fe+ 催化,效率为6*10-4 mol/mol.S,而用过氧化氢酶催化,效率为6*106 mol/mol.S。 用?-淀粉酶催化淀粉水解,1克结晶酶在65?C条件下可催化2吨淀粉水解。 1.高效性 一、酶的特性 酶的专一性 Specificity 又称为特异性,是指酶在催化生化反应时对底物的选择性 2、专一性或选择性 一、酶的特性 (三)酶催化作用特性 酶促反应一般在pH 5-8 水溶液中进行,反应温度范围为20-40?C。 高温或其它苛刻的物理或化学条件,将引起酶的失活(不稳定性)。 3.反应条件温和,容易失活 (三)酶催化作用特性 一、酶的特性 4.酶活力可调节控制 如抑制剂调节、共价修饰调节、反馈调节、酶原激活及激素控制等。 5.某些酶催化活力与辅酶、辅基及金属离子有关。 (三)酶催化作用特性 一、酶的特性 二、酶的化学本质及其组成 (一)Enzyme的化学本质 Enzyme的化学本质是蛋白质,具有蛋白质相同的理化性质。 (二)Enzyme的组成和分类 1、简单蛋白质:如脲酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及核糖核酸酶等。 2、缀合蛋白

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