肺癌患者血清p53抗体的诊断意义.docVIP

精品论文 参考文献 肺癌患者血清p53抗体的诊断意义 潘洁茹（广东省佛山市第一人民医院检验科 广东佛山 528000) 【摘要】目的 探讨血清p53抗体对肺癌患者诊断价值。方法　采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测60例正常健康人和120例肺癌患者血清p53抗体。结果　肺癌患者血清p53抗体水平和阳性率均明显高于正常人（P＜0.05）。结论　检测血清p53抗体水平有助于肺部恶性疾病的诊断。 【关键词】肺肿瘤 血清p53抗体 酶联免疫吸附法 【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）04-0196-02 近年的研究发现，肺癌的发生、发展是一个多基因参与的复杂过程，其中p53基因结构和功能异常在肺癌的发生、发展过程中起重要作用[1]。分析p53基因变化可采用分子生物学、免疫组化、血清学等多种方法[2]，前两种方法由于操作复杂和繁琐不易在临床推广，而血清学方法具有操作简便、重复性好，不需肿瘤标本等优点，目前越来越受到广泛重视。本研究应用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)法检测120例肺癌患者血清p53抗体水平，并与正常健康人作比较，以探讨检测肺癌患者血清p53抗体的临床意义。 1　材料与方法 1.1　检测对象　正常组60例，均为本院门诊作健康体检者。男30例，女30例，年龄22～65岁，平均37.5岁。肺癌组120例，男96例，女24例；年龄22～75岁，平均57.8岁；所有病例均经临床病理诊断证实。 1.2　标本的收集　真空血清促凝管采集受检者当日空腹静脉血2ml，离心分离血清。当日未检测血清置于－20℃冰箱保存备测，并与一周内测定。 1.3　检测方法　应用ADL公司Mousc-human antioncogene p53-17q13.1 ELISA试剂盒及西班牙TRIURUS全自动免疫分析仪，操作严格按说明书进行：(1)洗涤重组p53蛋白或质控蛋白包被的聚苯乙烯微量反应板，将稀释的样本、质控及标准品各100ul分别加入到相应反应板微孔内,(2)各孔分别加入酶标记溶液50uL,36plusmn;20C震荡温育1小时，(3)洗板机洗涤5次后吹干，加入酶反应底物A、B液各50uL，36plusmn;20C避光反应15分钟，加入20uLH2SO4终止酶反应。用酶标仪测定450nm读取各孔吸光度。p53抗体浓度用两个不同参数确定： 指数(index)＝(样品p53蛋白净吸光值－质控蛋白净吸光值)/(低值阳性质控p53蛋白净吸光值－质控蛋白净吸光值) 吸收率(ratio)＝(样品p53蛋白净吸光值)/(质控蛋白净吸光值) 1.4　统计学处理　本实验数据采用Excel2007建立数据库，t检验、F检验、chi;2检验进行统计分析，采用SPSS13.0系统软件处理。 2　结果 2.1　不同组别血清p53抗体指数和吸收率的比较　正常人和肺癌患者血清p53抗体指数和吸收率经F检验有显著性差异（P＜0.05）（表1）。 表1　肺癌组与正常组间血清p53抗体指数和吸收率的比较 组 别 数目 P53抗体指数 吸收率 正常人组 60 0.631plusmn;0.190 0.135plusmn;0.329 肺癌组 120 1.362plusmn;0.152 1.521plusmn;0.765 2.2　术前不同组别血清p53抗体阳性率的比较　60例正常人血清p53抗体指数的x-＝0.631，s＝0.116，吸收率的x-＝0.135，s=0.200，以超过x-＋1.645s为判断阳性标准，即指数＞0.822和吸收率＞0.464，分别判定指数和吸收率阳性，当二者同为阳性，即判定为p53抗体阳性。正常健康人无一例阳性。120例肺癌患者中有65例血清p53抗体阳性，阳性率为54.2％。经chi;2检验，肺癌组与正常组间有显著性差异（P＜0.01）。 3　讨论 p53基因突变是人类肿瘤最常见的基因改变[3]，约50％～60％的非小细胞肺癌和80％小细胞肺癌有p53突变[4，5]。突变的结果导致异常的p53蛋白产生，其构象异常使半衰期延长至数小时，从而在细胞内聚积。聚积的突变型p53蛋白作