灰树花发酵工艺的优化及灰树花多糖的功能研讨.pdfVIP

i熏囊雾爹譬糖。藕强纂黧 全国功能性生物制品生产与应用技术交流展示会论文集 灰树花发酵工艺的优化及灰树花多糖的功能研究 山东京博生物科技有限公司 汪维云 维吉尔(青岛)生物制品有限公司 杨一巍 摘 要 对灰树花发酵工艺的主要因子通气量和pH值进行优化试验，以茵丝生物量为响应值，建立了响 菌丝生物量进行了拟合，经过网络学习和训练，效果也较理想，与回归法相近。还探讨了灰树花多糖制 处理，经灌胃考察免疫调节的作用。结果表明，超过0．279的剂量时，可以提高小鼠的足跖肿胀度，抗 体细胞生成数，有很好的免疫调节作用。 关键词 灰树花发酵工艺优化灰树花多糖 免疫调节 近年来，作为免疫调节剂的真菌多糖成了研 1．1．4实验动物：健康昆明种小鼠，雌性(功能 究的热点。灰树花多糖因其具有广泛的药理作用 评价要求单一性别)，体重18—229。 和功效受到国内外众多研究者的广泛关注【ll。灰 1．2优化试验方法 树花液体发酵是工业化、集约化生产灰树花多糖 1．2．1试验方法：试管菌种经过活化，接入300ml 的重要途径【习。优化发酵工艺，是液体发酵的关 三角瓶(培养基装量100m1)在来复式摇床中培 键，我们对影响发酵工艺的重要因子通气量和pH 值进行试验，以期获得最佳的发酵培养条件，从 菌丝球并均匀分散在培养液中时转人种子罐(装 而提高发酵水平。文献报导，灰树花多糖具有明 料量5L)中培养，培养温度25℃，通气量1：1．4 显的抑制肿瘤、抗HIV病毒，改善免疫系统功能， (体积比)，培养36h，大量的菌丝球已形成，这时 调节血糖、血脂及胆固醇水平，降血压等功 通过压力差把种子罐中的菌液压入发酵罐(装料 效【蚓。我们对灰树花多糖单一成分制成的制剂的 量50L)中进行培养，并对菌液在最后一级的培养 免疫调节作用作了初步的研究。 进行pH值和通气量对菌丝生物量的影响进行研 1材料与方法 究。 1．1材料 1．2．2发酵液中的菌丝生物量测定：10ml发酵液 1．1．1试验菌株：灰树花菌株，由中国科学院微 3000r／min，离心15min，用分析天平称重。 生物研究所提供，菌种保存在马铃薯琼脂培养基 1．3功能实验方法 (PDA)上，保藏温度为4℃。 1．3．1分组方法：维吉尔胶囊人体推荐剂量为 1．1．2发酵培养基为：葡萄糖20#L、豆粉30vL、 KH2PO。1．5#L和有机物7p／L。 体重，上、下同时设一个剂量组：0．819／kg体重 1．1．3制剂样品：灰树花多糖制剂，内含褐色灰 树花多糖粉(维吉尔生物制品有限公司生产)。 所需浓度，同时设立水对照组，连续灌胃60d。 ·148· 全国功能性生物制品生产与应用技术交流展示会论文集 藿霎萋男墓≥篝i媾，、：籀}囊妻雾薹鬟 1．3．2迟发性变态反应(DTH)(足跖增厚法)小 根据试验得到的数据(见表2)，以菌丝生物 鼠腹腔注射2％SRBC(慢反应物质)，致敏后4d测量作为响应值，通气量和pH值为自变量，建立响 量左后足跖厚度，然后在测量部位下注射20％ -0．1 (1) SRBC，每鼠注射201上1，注射后24h测量左后足跖 278x】2-0．0495x22 部厚度，同一部位测3次，取均值。以攻击前后 式中：r为菌丝生物量； 足跖厚度差值(足跖肿胀度)来表示DTH的程度。