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形态 牛君星 目录 组织包埋切片 染色 冰冻切片 组织包埋切片 组织包埋切片简介 组织包埋是将客户组织标本通过固定，取材，脱水等过程后，用石蜡作为包埋剂，将组织标本包埋在石蜡中！ 标本 固定 取材 脱水、透明、透蜡 包埋 切片 组织包埋切片过程步骤 、一、固定：组织和细胞离开机体后，在一定时间内仍然延续着生命活动，会引起病理变化直至归于死亡。为了使标本能反映它生前的正常状态，必须尽早地用某些化学药品迅速地杀死组织和细胞，阻抑上述变化，并将结构成分转化为不溶性物质，防止某些结构的溶化和消失。这种处理就是固定。除了上述作用外，固定剂会使组织适当硬化以便于随后的处理，还会改变细胞内部的折射系数并使某些部分易于染色。 固定液： 4%多聚甲醛 Bouin氏固定液 FAA FAS(眼球固定液） 组织包埋切片过程步骤 二，取材：组织固定完成后，要进行脱水，在脱水前为了选取目的组织同时也为了脱水能够顺利进行，要对组织进行有目的性的切割，这个过程就叫取材。 心脏（心室 心房） 脑（海马 黑质 纹状体 ..) 肠 （长条 圆环） 皮肤（全层） 组织包埋切片过程步骤 取材注意事项： 1.切面要平整，厚度不易超过2mm，否则脱水效果不能保证。 2.对于有特许要求的组织，取材时要保证对目的组织的完整保留。 组织包埋切片过程步骤 三，脱水：生物组织中含有大量的水分，它和石蜡是不能相溶的，致使在包埋时石蜡无法渗入组织内部，因此须使用脱水剂将水分除尽，这就是脱水的作用。 组织包埋切片过程步骤 四、透明：组织块用非石蜡溶剂脱水后必须经过透明。透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合，它取代了脱水剂后，石蜡便能顺利地渗入组织。 组织包埋切片过程步骤 五、透蜡和包埋：组织脱水后在透明剂（二甲苯）中透明后，融化的石蜡就容易进入组织中，然后将组织放入模具中倒入液体的石蜡，待凝固，组织就包埋成组织蜡块了。 组织包埋切片过程步骤 六、切片：包埋好的蜡块就可以进行切片，一般切 片的厚度在3到6微米（默认4微米），过薄过厚 都不容易切片！ 植物 脂肪（5-8微米） 染色 染色 活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。 针对组织的不同及需要观察特异性，染色里面分很多中，下面，我们来看看一些常见的染色。 HE染色 苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ，简称HE染色法 ，石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ；伊红为酸性染料 ，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。 HE染色 染色结果：细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。 Masson染色 主要用途： 主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。 检验结果： 胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维、纤维素和红细胞染红色、胞核染蓝黑色。 PAS糖原染色 染色原理 　　PAS染色全称为过碘酸雪夫氏染色（periodic acid shiff，PAS），又称糖原染色。胞浆内存在的糖原或多糖类物质（如黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖酯等）中的乙二醇基经过碘酸氧化，转变为二醛基，与雪夫试剂中的无色品红结合，形成紫红色化合物而沉积于胞浆中糖原类物质所存在的部位。等可显示阳性反应，呈紫红色。 适用范围 用于显示糖原和多糖类中性粘液和酸性粘液物质，而且还能显示基底膜、系膜基质、纤维蛋白、血管透明变性、淀粉样等物质。