基质辅助激光解析飞行时间质谱在临床病原菌检测中的应用进展.pdfVIP

1nfect 238 中国感染与化疗杂志2()12年5月20日第12卷第3期chinJ Chemother．May2012，V01．12．No．3 ·综述· 基质辅助激光解析飞行时间质谱在临床病原菌检测中的应用进展 靳颖， 王俊妨， 崔云涛， 刘 锦 关键词： 基质辅助激光解析飞行时间质谱； 病原菌检测I 应用进展 中图分类号：R378文献标志码：A 文章编号：1009—7708(2012)03一0238—03 Latest ofmatrixassistedlaser application desorption／ionization mass inidentificationcIinical spectrometry of pathogens Y0挖地o，L儿J，{理． ．，fNⅥ月g，WANG．，Ⅳn如咒g，CUJ (DP户口几men￡o．厂La60rnforyMPdi“行P，AJ7i￡缸 ￡Pd A门∞已d HDs户i加Zo，Logi站抬sCDzzPg已o，C^i牡esPP∞户如7s 近年来质谱仪技术有了快速的发展。20世纪 待测组分中的杂质(如较高浓度的盐、非挥发性成分 80年代，基质辅助激光解析飞行时间质谱(matrix以及去垢剂)不影响目标物质的测定，且信息直观、 assistedlaser desorption／ionizationtime—of_flight操作简单、快速准确等¨】。 mass spectrometry，MALDI—TOF—MS)的诞生，奠 定了基于蛋白质指纹图谱鉴定微生物的硬件基础。 析，包括蛋白质、脂类、脂多糖和脂寡糖、DNA、多肽 每种微生物都有自身独特的蛋白质组成，质谱仪具 及其他能被离子化的分子。细菌含有一些成分，能 有测定荷电离子质量的能力，可测得待检微生物的 给出唯一的质荷比，作为生物标志分子特异鉴定细 蛋白质质量指纹图谱，经软件对这些指纹图谱进行 菌。刘海洪等口3综述了质谱鉴定细菌原理及分析成 处理并和数据库中各种已知微生物的标准指纹图谱 分和技术方法，由于这些成分具有种、属特征或与其 进行比对，即可以完成x寸微生物的签定。由于测定 分类位置密切相关，可作为细菌分类的指标或生物 的图谱中主要的分子离子峰为菌体内高丰度，且表 标记物标识某一类或某种细菌的存在。 达稳定、进化保守的核糖体蛋白，因此这一方法不仅 鉴定结果可靠，而且还可以通过聚类分析获得微生 物间的进化和亲缘关系。 菌的论文快速涌现卜…】，报道了临床上针对沙门菌属、 一、MAI。DI—TOF—MS检测的工作原理 志贺菌属、大肠埃希菌、白念珠菌、铜绿假单胞菌、诺卡 MALDI—TOF MS的基本原理是将微生物样品 菌属、葡萄球菌属等重要病原菌成功鉴定的实例，体现 与等量的基质溶液混合或分别点加在样品的靶盘 了这一技术在临床病原菌鉴定中的应用前景。 上，溶剂挥发后形成样品与基质的共结晶；利用激光 在临床实验中Seng等¨¨共分离出1660株细 作为能量来源辐射结晶体，基质从激光中吸收能量 菌，并对MALDI—T()F—Ms BioTyper数据库和常规 使样品吸附，基质与样品之间发生电荷转移使得样 表型鉴定进行了比较．两种方法结果不一致的通过 品分子电离．样品离子在加速电场下获得相同的动