胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用.docVIP

精品论文 参考文献 胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用 王鸿玲 （贵州省黎平县人民医院检验科 557300） 　　【摘要】目的 评价胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用。方法　使用妊娠中育龄妇女、非妊娠中妇女晨尿样本以及不同浓度的人绒毛膜促性腺激素（HCG）标准品评价胶体金法检测HCG的特异性和敏感性。结果　胶体金法的测试准确率99.75%，对HCG的最低敏感度达到25IU/L。结论　胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中简单、快速、准确，是目前较理想的诊断方法。 　　【关键词】胶体金法尿妊娠试验 育龄妇女妊娠 　　【中图分类号】R714.15 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）32-0081-02 　　成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的HCG，可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。当妊娠1至2.5周时，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8孕周达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期[1]。HCG的检查对早期妊娠诊断有重要意义，对妊娠相关疾病、滋养细胞肿瘤等疾病的诊断、鉴别和病程观察等有一定价值。常用的检测方法有血凝抑制试验、放射免疫试验（RIA）、酶联免疫法（ELISA）、单克隆抗体胶体金实验。本文通过对胶体金法尿妊娠试验对HCG的特异性、敏感性测试，评价胶体金法尿妊娠试验在判断育龄妇女妊娠中的应用，现报道如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　随机选取我院门诊151份停经育龄期妇女晨尿样本，50份非妊娠中妇女晨尿样本以及用HCG标准品配成0、25、50、100、200、500IU/L的溶液。151位停经育龄期妇女经复诊或随访证实。 　　1.2 方法 　　1.2.1 准确度实验 　　使用胶体金试纸测试151份停经育龄期妇女晨尿样本和50份非妊娠中妇女晨尿样本，重复两次，计算此方法判断育龄妇女妊娠的准确率。 　　1.2.2 敏感度实验 　　使用胶体金试纸检测0、25、50、100、200、500IU/L不同浓度的HCG溶液，得出胶体金法对HCG的最低敏感度。 　　1.2.3 试纸条的显色情况对比 　　将上述样品按浓度从低到高顺序排列，观察试纸条检测后显色情况以及其梯度的变化。以上的具体操作均在常温下严格按照说明书操作，将试纸条下端插入样品中，其深度不宜超过MAX线，5 秒后取出平放，10 min时观察结果。 　　2 结果 　　2.1 准确度实验 　　胶体金试纸对151份停经育龄期妇女晨尿样本和50份非妊娠中妇女晨尿样本的第一次检测准确率100%，第二次准确率99.5%，见表1。 　　表1 胶体金试纸、酶联免疫法准确度比较 　　次序 妊娠期育龄妇女晨尿样本 非妊娠中妇女晨尿样 　　 阳性 阴性 阳性 阴性 　　胶体金试纸第一次检测 151 0 0 50 　　胶体金试纸第二次检测 150 1 0 50 　　 　　2.2 敏感度实验 　　检测0、25、50、100、200、500IU/L不同浓度的HCG溶液，胶体金试纸的最低敏感度达到25IU/L，见表2。 　　表2 胶体金试纸、酶联免疫法敏感度比较 　　方法 HCG IU/L 　　 500 200 100 50 25 0 　　胶体金试纸 深红 深红 红色 红 浅红 无色 　　 　　注：滴加溶液五分钟内观察颜色。 　　2.3 试纸条的显色情况 　　选取部分浓度值试纸条检测结果的具体显色情况。胶体金试纸条的显色浓厚、均匀，条带的边缘清晰而且层次感突出。在不同的浓度范围，试纸条的检测线与和质控线呈现出一定的规律变化。 　　3 讨论 　　胶体金是由氯金酸在还原剂如白磷、抗坏血酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金[2]。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。胶体金标记，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能，可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合，因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具[3]。 　　本次使用的是胶体金免疫层析法，将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂吸附在结合垫上，当