胶体金技术在临床检验诊断中的研究进展分析.docVIP

精品论文 参考文献 胶体金技术在临床检验诊断中的研究进展分析 广西省桂林市全州县中医医院检验科 541500 摘要 胶体金技术因其操作简便在如今临床诊断中应用广泛，其独特的物理特性和生物相容性使之得到广大检验人员的青睐。本文将就其原理、特点及其在临床检验诊断中的研究进展对该技术进行分析。 关键词 胶体金 临床检验 诊断 进展 胶体金技术作为一种新型固相免疫标记技术，由20世纪 80年代发展起来，又被称为胶体纳米金。由于其表面积大，生物相容性好，具有独特的导电、导热及光学特性，使之逐渐成为纳米诊断的首选材料[1]。胶体金技术将胶体金作为标记物 ,通过抗原抗体的特异性反应 ,利用胶体金颗粒上的颜色来显示和放大免疫反应来检测待测样品中有无相应的抗原或抗体，使结果在固相载体上清晰可见。胶体金技术操作简便，样品需要量少，结果判读快速、方便[2]。广泛应用于自身免疫系统疾病、心血管疾病、感染性疾病及风湿病等的抗原、抗体检测和诊断及各种激素、蛋白质及药物的检测[3]。本文就其在临床检验诊断中的研究进展作一总结综述 。 胶体金技术的原理 近 １０ 年来，随着医学的不断发展和改进，胶体金技术不断成熟 ,使之在免疫和分子等方面迅速发展，并得以广泛应用[4]。免疫胶体金技术将胶体金作为标记物应用于抗原抗体的特异性反应，属于免疫标记技术。氯金酸水溶液与还原剂反应，形成疏水且带负电的金颗粒悬液，而静电作用又使之保持胶体状态，故称胶体金。胶体金技术用硝酸纤维素膜作固相载体，被胶体金标记的抗原或抗体在膜上发生特异性反应，通过胶体金的呈色信号得以判别。 胶体金技术的特点 胶体金技术属于包括荧光素、放射性同位素和酶三者在内的四大免疫标记技术之一，其在生物、医学中各领域，尤其是在医学检验中应用日益广泛。由于胶体金具有独特的导电导热特性、光学特性、良好的生物相容性及其特殊的纳米特性，如小尺寸效应、表面效应及宏观量子隧道效应，比表面积大，可与蛋白质、核酸等结合，使其与另外三大标记技术相比，具有以下特点：①胶体金试纸条体积小，便于携带，保存时间较长，故适用于各级医院、基层单位、住宅、野外工作者及偏远地区等使用；②胶体金制备简单，成本低，价格低，容易使普通人接受；③胶体金颗粒均匀，大小可控，可进行多重标记，同时对多种物质进行检测；④本身颜色鲜艳，检测结果呈酒红色，肉眼清晰可辨，无需使用仪器设备辅助判读，无需前处理，结果判断直观、快速、可靠；⑤胶体金一般不发生非特异性吸附作用，故其特异性与敏感性都很高[5]；⑥操作方便，样本多样化，且用量少，现场即可以进行检验、诊断，省去了繁琐的常规操作，检测时间大大缩短，操作误差也相应减小，患者易接受。 胶体金的应用方向 胶体金技术由最开始的只在免疫电镜中应用开始发展，现已在现已在医学、生物等方面广泛应用，尤其在医学检验方面应用最广。由胶体金延伸发展出的技术已有胶体金免疫层析技术、斑点金免疫渗滤法等。除此之外，胶体金还在比色法、荧光共振能量转移、分子信标中广泛应用。例如在医学检验中，普遍使用胶体金的检测项目就有乙肝、早早孕、病毒细菌及寄生虫病的检测等[6]。 3.1 胶体金免疫层析法 胶体金免疫层析法采用抗原抗体反应原理，将胶体金-抗体结合物附着在金标垫上，将试剂条浸入样本后，样本中的靶抗原将与其结合形成抗原-抗体-胶体金复合物。以商品化试剂条为例，检测带上呈条带状固定特异性抗原或抗体，另一种特异性抗体或抗原标记于胶体金上，用玻璃纤维吸附，并固定于硝酸纤维素膜的一特定位置，作为胶体金结合垫，传统结构包括金标垫、硝酸纤维素膜、样本垫和吸收垫，将干燥试剂条检测端浸入样本，样本因毛细作用随纤维素膜至上移动。若样本中含有待检的特异性结合物，则当样本移动至金标垫时，就会与胶体金标志物发生特异性抗原-抗体反应，形成抗原-抗体-胶体金复合物，因胶体金标志物即可得到直观显色，此为检测带。样品随毛细作用继续前移，与条带上另一特定位置附着的胶体金标记的IgG抗体反应，出现红色条带为正常，作为质控线[7]。 近年来，胶体金免疫层析技术已得到更大的改进，例如检测肉毒梭菌神经毒素的双检测线技术。无需仪器，肉眼就能清晰辨别两种不同的血清型神经毒素，操作简单快捷，敏感性高。 3.2 斑点金免疫渗滤法 斑点金免疫渗滤法由斑点免疫渗滤试验发展而来，这一种新的检测方法将胶体金标记物、免疫渗滤技术与固相载体技术相结合，其原理包括间接法和夹心法。把标本和试剂滴加到固相载体硝酸纤维素膜上，抗原抗体反应和洗涤过程利用微孔滤膜的半透特性，使其快速渗滤完成。斑点金免疫渗滤法检出限低，斑点显色清晰，肉眼可见，结果易判定，操作快速简便。 因此诸多优点，斑点金免疫渗