环境样品前处理-第6章衍生化.pptVIP

6.1 衍生化目的与条件 6.1 衍生化目的与条件 机理 6.1.1衍生化的目的 6.1.2 衍生化的条件 柱前衍生化反应需满足的条件： ① 反应迅速、定量、重复、条件不苛刻、易操作； ② 选择性高、具有专一性； ③ 反应产物只有一种，无干扰； ④ 衍生化试剂易得、通用性好。 6.1.2 衍生化的条件 2. 柱后衍生化反应需满足的条件： ① 反应迅速、定量、重复； ② 反应条件与色谱条件适应； ③ 反应产物可检测； 6.2.1气相色谱柱前衍生化 1. 硅烷化衍生化方法 2. 酯化衍生化方法 ① 甲醇法 ② 重氮甲烷法 ③ 三氟乙酸酐法 3. 酰化衍生化方法 3. 酰化衍生化方法 3. 酰化衍生化方法 4. 卤化衍生化方法 4. 卤化衍生化方法 荧光衍生试剂 常用的荧光衍生化试剂（亦称荧光探针）有： 1.丹磺酰氯（1-二甲氨基萘-5-磺酰氯） 2.丹酰肼（1-二甲氨基萘-5-磺酰肼） 　　　（3）电化学衍生化反应 样品与某些试剂反应，生成具有电化学活性的衍生物，以便在电化学检测器上有较高的响应。 环境介质对电化学反应有很大影响，如离子强度、pH值和溶剂组成等 。 　　 　常用的电化学衍生化试剂 ： （1）带硝基的芳香化合物：P141表6-4 （2）芳氨基、酚羟基等　 　 柱后反应器 毛细管式 空气分割式 填充柱式 6.2.4 固相化学衍生化法 （1）还原型固相反应剂 6.2.4 固相化学衍生化法 酶是一种具有特殊三度空间构象的蛋白质，能够催化某一底物进行特异性化学反应，生成特定的反应产物。 酶的催化反应具有高度的专一性 酶试剂通常在反应中是不消失的，可重复使用 酶的固定化可分为化学和物理两种方法，化学法是指在酶和载体之间生成共价键，并保留其生物活性，而物理方法仅是吸附在固体表面。 2. 固定化酶 2. 固定化酶 酶一旦被固定，其稳定性增加。 利用酶反应的专一性完成的衍生化反应，可以改变底物的化学特性，提高色谱分析的灵敏度和选择性。P144图 6-3 ?????? 其它衍生化方法：手性衍生化 　用手性试剂与外消旋体反应，在分子内导入另一手性中心，柱前衍生反应生成一对非对映异构体，两者间无镜相关系，物理化学性质不同，可用常规的色谱分离条件进行分离。 手性衍生化分离通常基于以下原因： 　 ⑴不宜直接拆分，如游离胺类在手性固定相上往往呈颇弱的色谱性质，生成中性化合物则获得显著改善． 　⑵添加某些基团，以增加色谱系统的对映异构选择性． 　 ⑶提高紫外或荧光检测的效果． 　 6.3 衍生化技术在环境分析中的应用 P144 作业 1.画出柱后衍生流程示意图。 2.用表格形式总结气相色谱柱前衍生化的方法原理和化学反应式 实验课 时间：5.22，5.29，6.5下午2：20 集合地点：西门-互助巷口 学习地点：礼让街23号 单位：青海出入境检验检疫局，五楼 7-N-哌嗪-4-二甲氨基苯并呋喃 4-氨甲基-6，7-二甲基香豆素 (ADMC) 9-蒽重氮甲烷 荧光衍生试剂的基本构成 取代基 荧光团（试剂分子母体） 反应基团 胆磺酰肼 DNS-H 荧光衍生化试剂亦称荧光探针 P140表6-3 常用的荧光衍生试剂 荧光衍生化试剂的分类： （一） 胺的衍生试剂 （二） 醇、酚的衍生试剂 （三） 羰基化合物的衍生试剂 （四）羧酸类化合物的衍生试剂 邻苯二甲醛 OPA 4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑 NBD-Cl 荧光素异硫氰酸酯FITC FMOC芴代甲氧基酰氯 6-氨喹啉基琥珀酰亚胺碳酸酯AQC （一）胺的衍生试剂： （二） 醇、酚的衍生试剂: 羰基氯类： FMOC, CEOC 磺酰氯类: DNs-Cl 卤代三嗪类: EDTN 1-乙氧基-4-(二氯-三嗪)萘（EDTN） （三）羰基化合物的衍生试剂: 肼类 DNs-HCEOC-H 氨基类 氨基甲基芘 （四）羧酸类化合物的衍生试剂: 溴甲基类 BrMMC 哌嗪基类 DBD-Pz 7-N-哌嗪-4-二甲氨基苯并呋喃 (4-溴甲基-7-甲氧基香豆素) （四）羧酸类化合物的衍生试剂: 重氮甲烷基类 ADAM 其它类 9-(2-羟乙基)-吖啶酮 HEA 4-氨甲基-6，7-二甲基香豆素 (ADMC) 9-蒽重氮甲烷 上述试剂与羟基、氨基、羧基、羰基化合物反应生成具有电化学活性的衍生物。 6.2.3 柱后衍生过程 将样品先注入色谱柱，按选定的色谱条件使样品组分得以分离； 当各个组分从色谱柱流出后，分别与衍生化试剂相遇，在一定的反应条件下，生成具有某种检测特性的衍生化产物 进入检测器测定。