刺参体腔细胞的超微结构观察研究.pdfVIP

刺参体腔细胞的超微结构观察 刘晓云1，谭金山2，包振民3，谢嘉琳4 (1巾国海洋大学环境科学与工程学院，山东，青岛266003；2青岛大学医学院，山东，青岛26602 3中国海洋大学生命学院，山东，青岛266003：4中国科院海洋研究所，山东，青岛266071) 严重制约了该产业的健康发展…。与刺参养殖业的发展相比，刺参免疫学研究相对薄弱。开展刺 参免疫学方面的研究工作十分熏要。国内外学者对无脊椎动物细胞及体液免疫的研究多集中在甲 壳类”1和贝类{”，海参免疫的相关研究鲜有报道。与刺参同属棘皮动物的虾夷马粪海胆(学名) 的体腔细胞被认为具有免疫功能【4】。本文以刺参体腔细胞为材料，观察体腔细胞的超微结构。以 期为进一步研究体腔细胞在刺参免疫防御反应中的作用提供形态学依据。 1材料与方法 1．1实验材料 成体刺参购自青岛崂山海参养殖场。 1．2方法 用无菌针管抽取刺参体腔液，戊二醛固定1h(戊二醛终浓度2．5960)，离心收集体腔细胞， 常规方法制作超薄切片，JEM．1200EX透射电镜观察并拍照。半薄切片用甲苯胺蓝染色，光镜观 察。 2结果 2．1 光镜观察显示，体腔细胞中有透明细胞和颗粒细胞，以颗粒细胞居多，颗粒细胞又分为大 颗粒细胞和小颗粒细胞，大颗粒细胞的颗粒具异染性。 2．2透射电镜观察与光镜观察结果一致，体腔细胞以颗粒细胞居多，透明细胞次之，淋巴样细 胞最少。颗粒细胞冈细胞中颗粒的大小和结构不同而呈现两种明显不同的细胞形态，其中以小颗 粒细胞居多，大颗粒细胞数量较少(图1)。 2．2．1大颗粒细胞 大颗粒细胞圆形，直径约5．10uin，胞内充满1．5-3uITI的颗粒，这些1．5-311m的颗粒由高 电子密度的细小颗粒所组成，酶细胞化学反应显示颗粒呈酸性磷酸酶阳性反应。颗粒之间的胞质 中有少量内质网及高尔基器，其他细胞器少见，细胞核较小(图2)。 2．2．2小颗粒细胞 u u 小颗粒细胞圆形，直径约7’8ITI，细胞中有许多0．5．1．5m、中等电子密度的颗粒。胞质 中内质网较丰富，偶见高尔基器和线粒体(图3)。 2．2．3透明细胞 um。胞质中含有内 透明细胞形状不规则，常有各种形状的细胞突起形成，细胞直径约5-6 质网、线粒体、高尔基器和液泡等，细胞核大、着色浅。细胞表面吞饮活跃，胞质中常见多泡小 体(图4，5)。 2．2．4淋巴样细胞 基金项目：国家重点基础研究发展规划资助项目(G1999012009)．山东省高校实验技术立项 35 淋巴样细胞常呈圆形，直径约5um左右。细胞饮人、异染色质团块分散确细胞核t斗，使细 胞核着色较深。胞质较少，胞质中有少量内质网和线粒体(图6) 3讨论 廖玉麟从显微水平将海参的体腔细胞分为淋巴细胞、吞噬细胞、血浆游走细胞311细胞【”。 通过电镜观察，作者认为根据细胞的超微结构特点，可将刺参体腔细胞分为大颗粒细胞、小颗粒 细胞、透明细胞和淋巴样细胞。 大颗粒细胞与小颗粒细胞不仅细胞颗粒的大小不同，而且其超微结构也不相同。小颗粒细胞 中的颗粒小、呈均质状、电子密度中等；大颗粒细胞中的颗粒明显大于小颗粒细胞中的颗粒，并 且与小颗粒细胞中均质的胞质颗粒有所不同，大颗粒细胞中的颗粒是由高电子密度的细小颗粒组 成的。细胞化学反麻显示，大颗粒细胞中的颗粒呈酸性磷酸酶阳性，而小颗粒细胞中的颗粒则呈 酸性磷酸酶阴性。半薄切片甲苯胺蓝染色也显示大颗粒细胞与小颗粒细胞着色不同，因此，作者 认为大颗粒细胞与小颗粒细胞不属同一种细胞的不同发育阶段，而是两种不同类型的细胞。 廖玉麟将海参体腔细胞中的大颗粒细胞称为血浆游走细胞。作者观察发现，刺参的犬颗粒细 胞不仅存在于体腔液中，还大量存在于消化道及其他组织中，表明刺参的大颗粒细胞可在体内游 走并停留在不同的组织中。有研究表明：中华绒蟹的颗粒细胞能伸出伪足吞噬，利用细胞内的溶 酶体酶进行细胞内消化【6]。刺参大颗粒细胞是否具有吞噬功能尚有待证实，但大颗粒细胞中颗粒 上的酸性磷酸酶阳性反应，以及消化道中大量存在大颗粒细胞提示这种细胞可能与食物的消化有 关。 透明细胞表面有伪足形成、吞饮活跃并且在细胞中有许多多泡小体，表明透明细胞具有吞噬、