微生物检测培训PPT.ppt

检测流程 （2）称量。用普通天平（精确度为0.01）按照计算结果依次称取所需试剂，并将所需试剂一次取齐，置于天平左侧，每种称取完毕后，移放于右侧 （3）溶化。将称量的试剂放入大烧杯或大烧瓶中，置于电炉上熔化，熔化后关闭电炉开关 检测流程 （4）初调pH。在调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入0.1mol/L NaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7．6。反之，则用0.1mol/L HCl进行调节 （5）分装。调好pH的培养基分装到锥形瓶中，分装时用玻璃棒将培养基导入到锥形瓶中 检测流程 （6）包扎 1）在三角瓶管口塞入棉花塞 2）用双层牛皮纸包裹棉塞及瓶口 3）用棉绳对其进行捆绑，捆绑位置在瓶颈处 检测流程 （7）灭菌。将包扎好的培养基放入高压灭菌锅进行灭菌 （8）无菌检查。将配好的培养基放置在37℃恒温箱中培养1～2天，确认无菌后方可使用 （9）保藏。将配制好的培养基放入冰箱进行保藏，保藏温度为4℃ 任务实施 1. 操作准备 2. 独立完成检测任务 3.无菌操作技术 4. 场地清理 总 结 1. 相关知识 2.实验准备情况 3.无菌操作技术 任务2 消毒灭菌技术 任务描述 岗位：微生物检验员 职责：根据实验要求对所需的仪器、培养基进行消毒灭菌。 任务：将实验需要的培养基、玻璃棒、烧杯、试管进行消毒灭菌。 任务分析 一 检测意义 在进行微生物检前，可以通过消毒和灭菌技术，不同程度的将实验物品和实验环境中的微生物减少甚至完全杀灭，从而减少或消除外来微生物对试验结果的影响，确保微生物检测结果的真实性和准确性。 二 检测方法 1、高压蒸汽灭菌 2、干热灭菌法 学习目标 知识目标： 1.常用的消毒灭菌的方法及灭菌原理。 2.高压灭菌蒸汽锅和干热灭菌箱的基本构造。 技能目标： 1.正确使用高压灭菌锅进行湿热灭菌。 2.正确对玻璃器皿进行包扎并使用灭菌箱进行干热灭菌。 素质目标： 1. 严谨工作意识 2. 环保意识 二、常用消毒灭菌的方法 三、湿热灭菌法 相关知识 1.湿热灭菌法：湿热灭菌是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固。 2.高压蒸汽灭菌 原理：基于水在煮沸时所形成的蒸汽不能扩散到外面去，而聚集在密封的容器中，在密闭的情况下，随着水的煮沸，蒸汽压力升高，温度也相应增高。 四、干热灭菌法 细菌的繁殖体在干燥状态下，80℃～100℃ 1小时可被杀死；芽胞需要加热至160℃～170℃ 2h才杀灭。 1．干热灭菌法机理：在干燥环境下进行的高温灭菌方法，在高温干燥的环境下使微生物氧化而并非使微生物的蛋白质变性。 2.干热灭菌法特点 （1）干热灭菌的介质一般是热空气 （2）温度高，一般大于200℃，有时甚至达320℃ （3）用于玻璃仪器，金属工具等的灭菌方法 相关知识 设备材料 （1）细菌培养基 （2）玻璃仪器 （3）干热灭菌箱 （4）高压蒸汽灭菌锅 检测流程 培养基的高压蒸汽灭菌 检测流程 培养基的高压蒸汽灭菌 （1）开盖。向左转动手轮数圈，直至转动到顶，使锅盖充分提起，拉起左立柱上的保险销，向右推开横梁移开锅盖。 （2）加水 1）首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。 2） 观察控制面板上的水位灯，当加水至低水位灯灭，高水位灯亮时停止加水。当加水过多发现内胆有存水，开启下排汽阀放去内胆中的多余水量。 检测流程 培养基的高压蒸汽灭菌 （3）通电。接通电源，此时欠压蜂鸣器响，显示本机锅内无压力，控制面板上的低水位灯亮，锅内属断水状态 （4）装锅、放入物品。将装好灭菌物品的灭菌篮放回灭菌桶，并装入待灭菌物品 检测流程 培养基的高压蒸汽灭菌 （5）加盖、密封 1）加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内 2）把横梁推向左立柱内，横梁必须全部推入立柱槽内，手动保险销自动下落锁住横梁，旋紧锅盖 （6） 设定温度、时间 1）按一下确认键，进入温度设定状态，按上下键可以调节温度值 2）再次按下确认键，进入时间设定状态，按左键或上下键设置需要的时间 3）再次按动确认键，设定完成，仪器进入工作状态，开始加热升温 检测流程 培养基的高压蒸汽灭菌 （7） 加压、排气、灭菌 1）待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀 2）继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭