自拟益气四虫汤对肝癌大鼠VEGF及COX-2表达的影响.docVIP

精品论文 参考文献 自拟益气四虫汤对肝癌大鼠VEGF及COX-2表达的影响 韩光霞 宿淑芝 杨仙妹 山东平度市中医院 266700 【摘要】目的 通过检测血管内皮生长因子(VEGF)及环氧合酶-2(COX-2)在肝癌大鼠中表达的变化探讨益气四虫汤对肝癌大鼠的干预作用。方法 40只雄性SD大鼠，随机分为空白组、模型组、益气四虫汤组、益气四虫汤防治组(简称“防治组”)，每组1O只。除空白组外。其余3组大鼠均以含0.05％2-AAF的饲料喂养12周，防治组在诱癌的同时灌服益气四虫汤。益气四虫汤组于诱癌第4周开始给药，剂量均为1.5g.kg-1.d-1（以含生药计算）。12周末观察瘤体积及瘤重量的变化，并采用免疫组织化学方法检测各组大鼠标本中VEGF及COX-2的表达。结果 模型组VEGF及COX-2的表达明显高于空白组(Plt;0.01)；益气四虫汤组、防治组VEGF及COX-2的表达明显低于模型组(Plt;0.01)；防治组优于益气四虫汤组。结论 VEGF及COX-2在肝癌大鼠中表达增强，益气四虫汤能降低肝癌大鼠VEGF及COX-2的表达,早期应用效果更好。 【关键词】益气四虫汤；肝癌大鼠；血管内皮生长因子；环氧合酶-2 原发性肝癌是我国常见的恶性肿瘤，发病率和死亡率占全部恶性肿瘤的第三位，易发生肝内外转移，预后较差。本实验利用肝癌大鼠模型，观察实验l2周末瘤体积及瘤重量的变化，并采用免疫组织化学检测方法，检测血管内皮生长因子(VEGF)及环氧合酶-2(COX-2)在肝癌大鼠中的表达，探讨益气活血复方中药益气四虫汤对以上指标的干预作用，明确该方的部分作用途径及可能机制。 1材料与方法 1.1 实验用药益气四虫汤(由黄芪、人参、蜈蚣、全蝎、地龙等组成)由平度市中医院药剂科制备；2-乙酰氨基芴(2-AAF)：Sigma公司。 1.2 实验过程及观察指标40只雄性SD大鼠，体重(120plusmn;10)g，随机分为空白组、模型组、益气四虫汤组、益气四虫汤防治组(简称“防治组”)，每组10只。空白组以标准颗粒饲料喂养，其余3组大鼠均以含0.05％2-AAF的饲料喂养12周，防治组在诱癌的同时，灌服益气四虫汤0.5g.kg-1.d-1。益气四虫汤组于诱癌第4周开始给药，剂量为0.5g.kg-1.d-1。空白组和模型组给以等体积的蒸馏水。各组每日灌药3h前后均禁食。12周末处死大鼠，解剖腹腔，取出肝脏，观察肝脏大体形态，测定瘤体积及瘤重量。各组用10％福尔马林液固定，石蜡包埋，制备成4m厚的切片，用于VEGF及COX-2免疫组织化学检测，明确其在蛋白方面的表达。 1.3 统计学处理使用SPSS13.0统计软件，所有数据均用均数plusmn;标准差表示，采用单因素方差分析法对实验结果进行统计学分析。 2结果 2.1各组瘤体积和瘤重量的比较益气四虫汤组、防治组与模型组相比，瘤体积缩小，瘤重量降低，有明显差异(Plt;0.01)；防治组瘤体积缩小及瘤重量降低优于组益气四虫汤组(Plt;0.01)。见表1。 表1.实验末各组瘤体积及瘤重量的测定结果 组别 瘤体积（mm3） 瘤重量（g） 模型组 220plusmn;32 0.97plusmn;0.31 益气四虫汤组 199plusmn;29△ 0.83plusmn;0.24△ 防治组 175plusmn;26△▲ 0.69plusmn;0.16△▲ 与模型组比较，△Plt;0.01；与益气四虫汤组比较，▲Plt;0.O1。 2.2 COX-2及VEGF免疫组化结果VEGF及COX-2蛋白主要分布于细胞浆中，VEGF阳性细胞显示棕黄色或棕褐色颗粒；COX-2阳性结果呈棕黄色颗粒。4组大鼠每组选取10只大鼠标本，每个标本测量10个高倍镜视野。用阳性染色面积和显示屏面积的百分比表示该成分的相对含量。结果显示，模型组、益气四虫汤组及防治组VEGF和COX-2相对含量与空白组相比明显升高，有显著性差异(Plt;0.01)；益气四虫汤组、防治组与模型组相比均明显降低，有显著性差异(Plt;0.01)；防治组明显低于益气四虫汤组(Plt;0.05)。见表2。 表2实验末各组肿瘤组织VEGF及COX一2的相对含量( plusmn;s) 组别