艾粉、艾片、艾油的抗氧化及抗络氨酸酶活性测定.docVIP

精品论文 参考文献 艾粉、艾片、艾油的抗氧化及抗络氨酸酶活性测定 卓燊1 廖泽勇2(通讯作者) 　　（1 广西科技大学医学院 广西柳州 545005） 　　（2广西药用植物园 广西南宁 530023） 　　【摘要】目的 测定艾粉、艾片、艾油的抗氧化、抗络氨酸酶活性。方法 采用DPPH法、生化酶学法。结果 艾粉、艾片、艾油与阳性对照清除DPPH自由基的大小顺序为：熊果酸﹥维生素C﹥艾油﹥艾粉﹥艾片，在抗络氨酸酶活性实验中，艾粉、艾片在0.25mg?mL-1时抑制效果最佳分别达到31.82%、41.67%，艾油的抑制率在0.25 mg?mL-1～2.0 mg?mL-1随着浓度的增加而上升，最高达到62.50%。结论 艾粉、艾片、艾油缺乏抗氧化活性，具有一定的抗络氨酸酶活性。 　　【关键词】艾粉 艾片 艾油 抗氧化活性 抗络氨酸酶活性 　　【中图分类号】R96 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2014）02-0359-02 　　艾粉为艾纳香叶入蒸器中加热升华所得的灰白色粉状物结晶。艾片为艾粉经压榨去油，炼成块状结晶，再劈削成的颗粒状或片状物。艾油为艾纳香叶的升华物经压榨分离而制得的油，是提取天然冰片产品的附属产品，其中含有左旋龙脑、樟脑、挥发油、油脂及其他有用成份[1-3]。艾粉、艾片、艾油为艾纳香挥发油的附属产物。艾纳香为菊科艾纳香属（Blumeabalsamifera(Linn.)DC），苗药名档窝凯Diangdvobbvid植物，药用为枝叶、嫩枝根，别名：大风艾、冰片艾、家风艾、大毛药、大艾等，具有通诸窍散郁火，消肿止痛等功效，分布广西、广东、云南、海南等地，广西及贵州有栽培。 　　1 材料与仪器 　　紫外可见分光光度计（UV-2102PC/PCS型）：尤尼柯（上海）仪器有限公司；分析天平：（Max220gd=0.01mg（100g），0.1mg（220g））：SartoriusCPA225D赛多利斯科学仪器（北京）有限公司。艾粉、艾片、艾油：武汉市铭业科技发展有限公司。2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl(2，2-二苯基-1-苦肼基，DPPH)：Sigma-Aldrich公司。 　　2 实验方法 　　2.1抗氧化活性测定方法 　　2.1.1DPPH法 　　参照文献[4]，将样品用无水乙醇配制成一系列浓度，取0.5mL试验溶液加入2.5mLc（DPPH）=0.06mmol/L的乙醇溶液，混合反应30min后测定517nm处吸光度。每份样品平行操作3次，取算术平均值，计算出对DPPH的清除率。计算公式为： 　　清除率%=（1-（Ai-Aj）/A0）times;100% 　　式中Ai为2.5mLDPPH溶液与0.5mL试样溶液混合后的吸光度，Aj为2.5mL无水乙醇与0.5mL试样溶液混合后的吸光度，A0为2.5mLDPPH溶液与0.5mL乙醇混合后的吸光度。 　　2.1.2半数抑制率的计算 　　半数抑制率（IC50）指清除率为50%时所需抗氧化剂的浓度，根据不同浓度抗氧化剂的清除率作曲线求出。 　　2.2抗络氨酸酶活性测定方法 　　2.2.1药物的配置 　　将艾粉、艾片、艾油、维生素C、alpha;-熊果苷、beta;-熊果苷分别溶于甲醇，配成浓度为0.0625、0.125、0.25、0.5、1.0、2.0mg?mL-1的试样溶液；称取0.0300g络氨酸酶底物溶于100mLPBS溶液(PH6.8,0.1M)配成浓度为0.03%多巴溶液；称取3.5g（965U?mg-1）络氨酸酶溶于25mLPBS溶液(PH6.80.1M)配成浓度为135U?mL-1酪氨酸酶溶液。 　　2.2.2药物对络氨酸酶的活性抑制 　　在试管中分别加入1mL试样溶液1mLPBS溶液(PH6.8,0.1M)和0.5mLDoPa溶液后在37℃下温育10min，然后加入0.5mL酪氨酸酶溶液(135U?mL-1)或0.5mLPBS溶液(PH6.8,0.1M)替代，在37℃下温育25min，以PBS溶液(PH6.8,0.1M)为空白调零，用紫外分光光度计在475nm处测定其吸光值、分别记为A、A0、B、B0[5]。以维生素C、alpha;熊果苷、beta;熊果苷作为阳性对照，具体配置方法见表1。酪氨酸酶的抑制率按以下公式计算： 　　抑制率（%）=[（A-A0）-（B-B0）]/（A-A0）times;100% 　　表1抗络氨酸酶活性测定供试液的配置方法 　　 　　 　　艾纳香植物资源丰富，分布广泛，取材方便，主要分布在我国长江以南的大部分省份。艾纳香油具有特殊的香气，