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水产动物致病性副溶血弧菌双重PCR检测方法的研究-海洋科学
水产动物致病性副溶血弧菌双重PCR 检测方法的研究
, , , ,
( , , 222005)
摘要: 副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus)是多种水产养殖动物的主要病原菌, 尤其是可引起凡纳滨
对虾幼虾呈毁灭性死亡。本研究基于 gyrB 和 toxR 两种基因序列设计 2 对特异性引物, 建立一种副溶
血弧菌快速、准确的双重 PCR 检测方法, 扩增目的片段大小分别为 285 bp 和 368 bp 。结果表明在同一
PCR 反应体系中副溶血弧菌可同时扩增大小分别为 285 bp 和 368 bp 的 2 种基因片段, 两种引物对 4
种其他水产动物病原菌无交叉反应; 敏感性检测结果显示, 该双重 PCR 最低能检测 8.867 2×103
CFU/mL 菌体浓度的副溶血弧菌, 对副溶血弧菌模板 DNA 的检出极限为 0.029 3 mg/L; 对发病中国对
虾糠虾幼体、水产品及虾池养殖用水进行双重 PCR 检测, 呈阳性反应的样品可分离出优势生长的副溶
血弧菌。该实验所建立的基于 gyrB 和 toxR 两种基因的双重 PCR 检测方法可用于副溶血弧菌引起的水
产动物疾病的快速诊断及分子流行病学的调查研究。
关键词: 副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus); gyrB 基因; toxR 基因; 双重 PCR
中图分类号: S941 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2010)10-0007-06
( Vibrio parahaemolyticus) —DNA B , Yamamoto
1995
, 1950 gyrB ,
, [5], gyrB DNA
, ,
[6]
, PCR toxR
,
, , [7], toxR
, , [8]
, () toxR [9]( Vibrio vul-
, nificus) [10]( Vibrio anguillarum)[11]
(Litopenaeus van- , toxR
namei)[1~3], , , toxR
[4] gyrB
toxR
, PCR ,
, ,
,
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