流式细胞术分析苜蓿相对DNA含量的样品处理方法-草业科学.PDFVIP

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流式细胞术分析苜蓿相对DNA含量的样品处理方法-草业科学

草 业 科 学 卷 期 1718-1723       31 09 / , 092014 PRATACULTURALSCIENCE Vol.31No.09 : DOI10.11829\.issn.1001G0629.2014G0096 j 流式细胞术分析苜蓿相对DNA含量的 样品处理方法 , 刘 倩 魏臻武 ( , ) 扬州大学动物科学与技术学院 江苏 扬州 225009 : ( ) , 摘要 为制备用于流式细胞仪分析的高纯度苜蓿 Medicaosativa细胞核悬液 筛选最适合流式细胞仪分析的苜 g , , 蓿细胞核提取方法 选用江苏地方品种淮阴苜蓿为供试材料 分别采用酶解法和机械解离法提取苜蓿细胞核悬 ; , . 液 用 种细胞核分离缓冲液及两种混合酶解液制备样品 根据各自优缺点筛选最适宜的苜蓿细胞核提取法 在 5 , , , 机械法所用的 种细胞核提取缓冲液中 缓冲液提取效果最好 提取的细胞核形态及内部结构完整 获得的 5 LB01 . , , 细胞核量多 利用两种混合酶液制备苜蓿细胞核悬液 均出现倍性明显的峰 混合酶液 制备的单细胞核悬液优 Ⅰ , , . 于混合酶液 且酶解法制备细胞核悬液 可获得数量更多更完整的原生质体 但利用酶解法制备细胞核原生质 Ⅱ , , . , . 体 其悬浮液中杂质多 需时较长 结果表明 LB01缓冲液为最适合制备苜蓿细胞核悬液的提取缓冲液 : ; ; ; 关键词 苜蓿 流式细胞术 酶解法 细胞核提取缓冲液 中图分类号: ; + 文献标识码: 文章编号: ( ) ∗ S816S551.7    A    1001G0629201409G1718G06 Sam le rearationforalfalfarelativeDNAcontentanalsisb flowctometr p p p y y y y ,

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