遗传第十二 免疫遗传学.ppt

重链基因家族V/D/J重排: 分为两个阶段,首先D-JH基因节段重组;然后VH与DJH基因节段重组。由于V/D/J重排和V/D、D/J接头处的灵活性,约计能够产生5.0×106(300×30×6×9×10)种重链活性基因。 基因定位：6p21.31 分类：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类 一、HLA系统的结构与组成 II类基因区 III类基因区 I类基因区 编码 编码 HLA-II类分子 HLA-I类分子 补体成分等 MHC-I类分子表达于除成熟红细胞、滋养层细胞和神经细胞之外的各种有核细胞、血小板和网织红细胞表面。 MHC-II类分子主要表达于B细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞和活化的T细胞表面。 MHC分子的分布： MHC-III类分子主要是一些存在于血清及其他体液中的可溶性分子。 HLA－Ⅰ类分子的结构　　 α链和β2m非共价结合的异二聚体分子。α链由胞外区、跨膜区和胞内区组成。 胞外区： α1、 α2 和 α3 封闭的肽结合槽 非共价结合β2m （容纳8－12个aa） 结合CD8分子（Tc） 多态性的基础 跨膜区(TM)、胞内区(CY)： 穿胞膜入胞内，锚定Ⅰ类分子 β2m 无种属特异性，有助于维持Ⅰ类分子天然构象的稳定性. MHC-Ⅱ类分子的结构 异二聚体分子（α链和β链） 胞外区 α1、 β1 α2、β2 开放的肽结合槽 Ig超家族 （容13～17个aa） 结合CD4分子（Th） 多态性的基础 槽外侧可结合超抗原 跨膜区 、胞内区 　作用似Ⅰ类分子。 ①抗原肽结合单位： 负责接纳抗原肽，也是被TCR识别的部位；②Ig样单位： 包括MHC-Ⅰα3和β2m以及MHC-Ⅱ的α2和β2，除了维持MHC分子的结构稳定之外，还分别与T细胞表面的CD4和CD8分子结合；③跨膜单位： 由连接肽，穿膜区和胞浆区组成，具有一定的信号传导功能。 MHC分子包括三个功能单位 HLA复合体的遗传特征： 1.共显性遗传 增加HLA抗原的复杂性和多态性 2.单倍型(haplotype)遗传 单倍型：连锁于一条染色体上的等位基因组合。分别来自父母的两个同源单倍型构成HLA的基因型，其编码产物为表现型。 3. 基因位点的高度遗传多态性 增加了移植配型的难度，但赋予物种极大的应变能力。 4. 连锁不平衡（linkage disequilibrium） HLA的基因紧密连锁，不发生同源染色体交换。 二、HLA与疾病的关联 很多自身免疫性疾病的发生都与遗传有关。迄今已发现70多种疾病与HLA基因多态性相关联，其中大多数的自身免疫性疾病与HLAII类基因关联。 1. 携带HLA-DR4的人罹患类风湿关节炎的风险比正常人高6倍。 2. I型糖尿病（胰岛素依赖性糖尿病）携带HLA-DR3和-DR4基因的白人发病率是正常人的20倍。 HLA与疾病的相关性 强直性脊柱炎患者 类风湿性关节炎导致关节变形 系统性红斑狼疮 约40％面颊部蝴蝶形红斑或盘状红斑 三、HLA配型与器官移植 组织器官移植的排斥反应 组织不相容性：供受体抗原差异，受体免疫系统识别异已引发的排斥反应 排斥反应的主要原因：HLA抗原（尤其是HLA-A、HLA-B、HLA-DR）和ABO抗原的差异 器官移植配型： 1.ABO抗原配型 2.HLA抗原配型 HLA配型与肾移植：HLA-A、B、DR、（DQ）无错配者5年存活率为70%。 HLA型别的匹配程度---- 配型 决定了移植物存活率的高低 HLA为单元型遗传，亲子之间一定有一个单元型相同，同胞之间一个单元型相同几率有50%，两个单元型相同几率为25%，两个单元型不同几率为25% 因此，器官移植时尽可能选择有血缘关系的供体。 进行组织器官移植时，往往因供受者之间的HLA型别不同而发生移植排斥反应，其排斥反应的强弱依次为 无亲缘关系者 亲属 同胞 同卵孪生儿 ＞ ＞ ＞ PCR-SSP分型:使用序列特异性引物(SSP)特异性地扩增HLA基因,然后通过凝胶电泳检测PCR产物,根据是否得到PCR产物,以及产物的片段大小来指定HLA基因型 PCR-SSOP分型:首先使用PCR 扩增某一段HLA 基因,然后通过与序列特异性寡核苷酸探针(SSOP)杂交来鉴定HLA型 SBT分型:以测定DNA序列为基础的HLA基因分型 传统HLA配型方法—血清学、细胞学方法：交叉反应、分辨率低、错误率高、受抗体来源限制，只是表型匹配 分子生物学方法—DNA分型:分辨率高、快速、准确，基因型匹配