肝细胞核因子4α抑制人肝癌细胞株血管内皮生长因子表达-胃肠病学.PDFVIP

胃肠病学２０１７年第２２卷第４期 ·２０３· ·论　　著 · 肝细胞核因子４ 抑制人肝癌细胞株血管内皮 α 生长因子表达和人脐静脉内皮细胞小管形成 １ １ １ １ ２ １＃ １＃ 汪海天 　张　勇　吴　宁　周　 　杭化莲 　马　永 　卞建民 １ ２ 南京医科大学附属南京医院普外科 （２１０００６）　上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科 　　背景：肝细胞核因子４（ＨＮＦ４）在肝脏的发育过程中发挥重要作用。研究证实ＨＮＦ４ 与肝细胞癌（ＨＣＣ）的 α α α 发生相关。然而ＨＮＦ４ 对人肝癌细胞株血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）表达和人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）小管形成 α 的调控作用尚不明确。目的：探讨ＨＮＦ４ 对人肝癌细胞株ＶＥＧＦ表达和ＨＵＶＥＣ小管形成的影响。方法：构建过 α 表达ＨＮＦ４ 的慢病毒，并转染人肝癌细胞株ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１（实验组），以转染慢病毒空载体和未转染的细 α 胞分别作为阴性对照组和空白对照组。分别以ｑＲＴＰＣＲ、蛋白质印迹法检测 ＨＮＦ４、ＶＥＧＦｍＲＮＡ和蛋白表达。 α 将ＨＵＶＥＣ与ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细胞不含血清的条件培养基共培养，检测小管形成数量。结果：成功构建了过 表达ＨＮＦ４ 的ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１稳转株。与阴性对照组和空白对照组相比，实验组ＨｅｐＧ２和ＳＭＭＣ７７２１细 α 胞中ＶＥＧＦｍＲＮＡ和蛋白表达均明显降低（Ｐ＜０．０５），ＨＵＶＥＣ小管形成数量明显减少（Ｐ＜０．０５）。结论：ＨＮＦ４α 能明显抑制人肝癌细胞株中ＶＥＧＦ表达以及ＨＵＶＥＣ小管的形成。 关键词　肝细胞核因子４；　癌，肝细胞；　血管内皮生长因子类；　人脐静脉内皮细胞 α ＨｅｐａｔｏｃｙｔｅＮｕｃｌｅａｒＦａｃｔｏｒ４ ＩｎｈｉｂｉｔｓＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆＶａｓｃｕｌａｒＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＧｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｉｎ Ｈｕｍａｎ α ＨｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒＣａｒｃｉｎｏｍａＣｅｌｌＬｉｎｅｓａｎｄＴｕｂｅＦｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＨｕｍａｎＵｍｂｉｌｉｃａｌＶｅｉｎＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌ　ＷＡＮＧ １ １ １ １ ２ １ １ １ Ｈａｉｔｉａｎ，ＺＨＡＮＧＹｏｎｇ，ＷＵＮｉｎｇ，ＺＨＯＵＪｉｎ，ＨＡＮＧＨｕａｌｉａｎ，ＭＡＹｏｎｇ，ＢＩＡＮＪｉａｎｍｉｎ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｅｎｅｒａｌ ２ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ＮａｎｊｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌＡｆｆｉｌｉａｔｅｄｔｏＮａｎｊｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ（２１０００６）；ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬｉｖｅｒＳｕｒｇｅｒｙ，Ｒｅｎ ＪｉＨｏｓｐｉｔａｌ，ＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｈａｎｇｈａｉＪｉａｏＴｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｃｏｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅ