生物分离工程曹学军两水相萃取过程的选择性生物分离工程.ppt

两水相萃取过程的选择性 (1) 细胞，细胞碎片影响分配（粘度） 总分配系数 (2) 亲和两水相分配 (3) 液体离子交换剂 两水相体系发展中的问题 相体系回收 (1) 环境 (2) 成本 成相聚合物的回收 (1) 压力敏感型两水相 (2) 热促相分离高聚物EO-PO (3) pH敏感型高聚物（聚两性离子高聚物, 多聚电解质) (4) 光敏感相分离高聚物 加氨基酸对相图的影响 加氨基酸对相密度的影响 氨基酸的分离配系数 系线长度与分配系数 EO-PO-HP-EOPO 高聚物结构式 相体系回收示意图 相 图 盐的分配 蛋白纯化 EOPO-HPEOPO高聚物回收 光敏感聚合物合成 两水相系统的应用 蛋白质纯化 抗生素，氨基酸，天然成分 酶相转移催化 细胞器分离 全回用两水相体系 意义： 1.合成可再生的聚合物。 2.构建两水相体系，使两相均能回收 3.较好的分离效果。 内容： 1.以异丙基丙烯酰胺（NIPA）、乙烯基 吡咯烷酮（NVP）、叶绿酸铜钠（CHL）三单体合成可再生光 敏感聚合物PNNC 2.PNNC与另一pH敏感聚合物PADB成相 3.应用该可再生两水相体系 2.聚合物PNNC的合成与表征 (1)聚合物PNNC的单体比例选择 绘制相图 （2）单水相PNNC溶液光照回收 （3）单水相PNNC溶液重复回收实验 （4）两水相两聚合物回收实验 （5）两水相两聚合物重复回收实验 3.蛋白质在两水相体系中的分配 4.氨基酸的分配实验 (1)盐种类对氨基酸分配的影响 采用色氨酸（Trp），酪氨酸（Tyr）为试样 结论 1. 通过自由基无规聚合，合成了水溶性光敏感聚合物PNNC 粘均分子量约为7.1×103。 2. 选取的成相体系为10％（w/w） PNNC与5％（w/w） PADB， 成相体积比为1：3。两水相中两聚合物多次光回收和pH回收都在95.5％到98.7％之间，一定程度上解决了聚合物回收率低的问题。 3.以氨基酸、蛋白质等生物物质为研究对象，考察该两水相系统的性质。其中Tyr、Trp的最佳分配系数分别为0.12、 6.25；溶菌酶、BSA的最佳分配系数分别为0.11、4.2。 4.该两水相体系对乳酸小分子的分配系数均接近于1，最大分配系数只有2.30。 5. 在乳酸的分配模型关联中，朱自强改进的D-H模型 相关性最好，说明在PNNC浓度8.0～12.0％范围内，该模型对乳酸在PNNC/PADB两水相体系中分配系数关联最为准确。 pH敏感型可回收丙烯酸类两性高聚物的合成及其在两水相中应用 PADB反应示意图： 4.聚合物成相实验 5.相图 2.无机盐种类及浓度对聚合物PADB单水相回收影响 4.无机盐种类对两水相PNBC/PADB聚合物回收影响 5.无机盐浓度对两水相PNBC/PADB聚合物回收影响 6.多次回收对两水相PNBC/PADB聚合物回收影响 3. 无机盐种类及浓度对分配系数的影响 结 论 1.通过自由基无规聚合，合成了pH敏感型的可回收丙烯酸类两性聚合物PADB ，其粘均分子量约为3.7×104，聚合物中三种单体摩尔比为AA：DMAEMA：BMA＝27.7：9.2：1； 2.由10％（w/w）PNBC /5％（w/w）PADB组成两种成相聚合物均可回收的两水相体系，成相体积比为1：2。经过五次循环使用后聚合物PNBC的回收率为97.8；PADB的回收率96.7； 3.该两水相体系对大分子有较好的分离效果，其中BSA最大分配系数可达27.5；溶菌酶的最大分配系数可达0.49； Phase transfer bioconversion of penicillin G into 6-APA by immobilized penicillin acylase in recycling aqueous two-phase systems with light-pH sensitive copolymers Relation between 6-APA partition coefficient and inorganic salts Partition coefficients change of substrate and products during Conc. Change of phenylacetic acid and 6-APA during bioconversios Total yield of 6-APA in top and bottom phase 小 结 1 Immobilized penicil