草鱼CNBP、eIF5A的克隆、组织表达及进化分析.pdfVIP

摘要 摘 要 idella)肝肾eDNA文库中克隆到草鱼细胞核酸 从草鱼(Ctenopharyngodon 结合蛋白和真核翻译起始因5A。 nucleic 草鱼细胞核酸结合蛋白(Cellularacid-binding protein,CNBP)全长 cDNA为1948bp。其中5’端非翻译区33bp，3’非翻译区1423bp。开放阅读框为 492 定位信号区和RGG框，与其他鱼类的同源性很高。与人及其他脊椎动物的相比， 草鱼CNBP在25处氨基酸位点发生替换，其中在第3个锌指中的第5个氨基酸 残基由Gly变成在鱼类中保守存在的His，另外在第1锌指和第2锌指结构间， 缺失6~14个氨基酸残基。但这种结构的差异还不足以产生新的功能，因为适应 性进化分析显示细胞核酸结合蛋白没有经历正达尔文选择佃≤1)。RT-PCR的实 验结果表明，在正常草鱼肝、肠、肾、脾、心、肌肉、鳃和脑8种组织中，CNBP 在草鱼心脏中表达比较显著，其次是脑、鳃、肌肉，在肾中也有微弱表达。 translationinitiatiOilfactor 草鱼真核翻译起始因子5A(eukaryotic 5A，elF．5A) 鱼elF．5A蛋白的N端含有elF．5A家族共有的羧腐胺赖氨酸，在蛋白C端包含 一段富含亮氨酸的结构域。草鱼elF．5A与人及其他动物的elF．5A具有较高的同 源性，只有少数氨基酸残基发生替换。适应性进化分析也表明eIF．5A不但具有 结构的保守性还具有功能的保守性。elF-5A在草鱼心、脑、肌肉、鳃、脾、肝 I：C的诱导而发生变化。 脏、肠、肾等组织中恒量表达，并且其表达不因Poly 关键词：草鱼；细胞核酸结合蛋EI(CNBP)；真核翻译起始因子5A(elF．5A)； 表达；进化 Abstract Abstract idellacellularnucleic Ctenopharyngodon acid-binding translationinitiationfactor beenclonedfromtheliver eukaryotic 5A(elF-5A)had and eDNA kidneygrasscarp library． 111e CNBPWaS1 containeda full-lenghth grasscarp 948bp，which 5’untranslatedof anda3’untranslatedof1 region 33bp region423bp．111eopen framewas couldcodea163aminoacid reading 492bp，which polypeptide． GrassCNBP carp containedsevenCCHCzinc domains．nuclear10cated finger signal all and RGG