高效液相色谱法测定生物胺衍生条件的优化研究.pdfVIP

第 8卷第 1期 南 方 水 产 科 学 Vo1．8．No．1 2012年 2月 SouthChinaFisheriesScience Feb．．2012 doi：10．3969／j．issn．2095—0780．2012．01．008 高效液相色谱法测定生物胺衍生条件的优化研究 杨贤庆 ，翟红蕾 ，郝淑贤 ，岑剑伟 ，魏 涯 ， 石 红 ，黄 卉 ，周娟娟 (1．中国水产科学研究院南海水产研究所 ，农业部水产品加工重点实验室，国家水产品加工技术研发中心， 广东 广州 510300；2．上海海洋大学，上海 201306) 摘要：利用荧光检测器 (FLD)，采用柱前衍生高效液相色谱法 (HPLC)对组胺 (HIS)、色胺 (TRP)、2-苯乙胺 (2一 PHE)、腐胺(PUT)、尸胺 (CAD)、酪胺 (TYR)、亚精胺 (SPD)和精胺 (SPM)8种生物胺 (BA)进行测定分析。通 过探究丹酰氯 (Dns—C1)质量浓度、反应体系的pH、衍生时间及衍生温度对生物胺衍生反应的影响 ，确定最优的 衍生条件。结果显示，当Dns—C1的质量浓度为BA质量浓度的10倍、pH11．0、40℃下避光反应45min，所有 BA均能有效分离。BA的相对标准偏差 (RSD)在 3％以内，能够满足分析要求。 关键词：生物胺；丹酰氯 ；柱前衍生；高效液相色谱法 中国分类号：TS254．7 文献标志码 ：A 文章编号：2095—0780一(2012)01—0049—05 Optimizationfordeterminingderivativeconditionsof biogenicaminesbyHPLC YANGXianqing，ZHAIHonglei ，HAO Shuxian ，CENJianwei， WEIYa，SHIHong，HUANGHui，ZHOUJuanjuan， (1．SouthChinaSeaFisheriesResearchInstitute，ChineseAcademyofFisherySciences；KeyLab．ofAquaticProductProcessing， Min~tryofAgriculture：NationalRDCenterforAquatwProductProcessing，Guangzhou510641，China； 2．ShanghaiOceanUniversity，Shanghai201306，China) Abstract：Usinghighperformanceliquidchromatographywithfluorescencedetectorandpre—columnderivatization，wedetermined8 biogenicamines(histamine，trptamine，2-phenylethylamine，putrescine，cadaverine，tyramine，spermidineandspermine)．Theopti- malderivativeconditionsaredeterminedby investigatingtheeffectsofdansylchlorideconcentration，pH ，reactiontimeandreaction temperatureonthederivatizationofbiogenicamines．Theresultshowsthatallaminesayewellresolvedwithdansylchloridewhosecon· centrationis10timesofthatofbiogenicaminesatpH 11．0and40℃ indarknessfo