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论文答辩橙皮中黄酮类化合物的提取研究PPT
橙皮中黄酮类化合物的提取研究 指导教师:孙卫青 答 辩 人:徐江岩 目 录 材料与方法 2 前言 3 1 结论 3 4 致谢 3 5 结果与分析 3 3 前言 1 结构与性质简介 2 生物活性 3 提取和测定方法的研究现状 4 研究现状及发展趋势 5 研究的目的和意义 结构与性质简介 黄酮类化合物是植物光合作用产生的一类重要的天然有机化合物,泛指由两个苯环(A环和B环)通过三个碳链相互连接而成的一系列化合物(C6-C3-C6)。根据中央三碳的氧化程度,B环连接位置,以及三碳链是否构成环状等特点,可将主要的天然黄酮类化合物分类,分别是黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮类、二氢黄酮醇类,大多以糖苷的形式存在。 生物活性 黄酮类化合物广泛存在于牧草、水果、蔬菜和药用植物中,植物长期自又选择过程中产生的一些次级代谢产物。迄今为止,在植物中已发现近10000种结构独特的黄酮类化合物。黄酮类化合物不仅结构样多,且不同类型的还表现出了不同的生物功能和活性。主要有抗氧化自由基作用、抗炎、抗过敏、抗菌、抗病毒活性、护肝活性、黄酮类化合物和维生素C在生物学系统中存在着相互作用的关系、雌激素作用、抗癌活性。 材料与方法 (1)试验材料及药品及仪器 实验材料:橙子皮 药 品:饱和石灰水,盐酸,氢氧化钠,石油醚(30-60),乙醚,乙醇,正丁醇,大孔树脂。 (2)试验方法 试验选定浸泡时间、pH值、固液质量体积比、超声时间四个因素来研究黄酮类化合物的溶解性。在每组试验中,用电子天平称量5份原料粉末于150ml广口玻璃瓶中,每份2.00g。然后加入饱和的石灰水调节pH值的一定体积、一定浓度的水溶液,静态浸泡,超声一段时间后,过滤。然 后 在 4000rpm 下 离 心20min ,大孔树脂吸附,取上清液于100ml容量瓶中,定容,取2mL提取液经NaNO-Al(NO)3显色后,在波长 510nm下测吸光度。 材料与方法 (3)黄酮含量的测定方法 取芦丁标准液(0.115mg.ml)精确吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4ml置于25ml试管中,加5%亚硝酸钠0.3 ml,放置6min,再加入10%硝酸铝0.3mL,放置6min,加入4%氢氧化钠4.0ml,加水至10ml刻度,摇匀。510nm处测定吸光值。 以吸光值(A)为纵坐标y,芦丁质量浓度为横坐标x,绘制标准曲线(见图1)。得到芦丁质量浓度x与吸光度y关系曲线的回归方程为: y=8.3437x+0.0033,R=0.9932. 材料与方法 提取液中总黄酮的含量测定:称取脱脂柑橘皮粉2.00g,提取完毕后,容量瓶定容至100ml,取2ml提取液测其吸光度,测定方法同上。 根据公式(1)计算由标准曲线换得的总黄酮的浓度,计算公式: C=y-0.0033÷8.3437 (2) y —单因素试验或正交试验中测得的吸光度(A) 根据公式(2)计算提取液中总黄酮提取率,计算公式: W(%)=c÷2.00 (3) W—柑橘皮总黄酮提取率(%) C—由标准曲线换算得的总黄酮浓度(mg/ml) 结果与分析 单因素实验 称取相同质量的橙皮粉末5份各2.00g,设定提取液体积50ml,pH值11.0,超声时间15min,浸泡时间分别为1h,3h,6h,9h,12h。然后再4000rpm下离心20min,大孔树脂吸附,分别取上清液于100ml容量瓶中,定容,取2ml提取液经NaNO-Al(NO)3显色后,在波长 510nm下测吸光度。 结果与分析 浸泡时间对黄酮提取液吸光度的影响 结果与分析 提取液pH值对黄酮提取液吸光度的影响 结果与分析 提取液体积对黄酮提取液吸光度的影响 结果与分析 超声时间对黄酮提取液吸光度的影响
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