遗传学教学课件第十章.pptVIP

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本章重点 ●细菌的结构特点 ●细菌的四种遗传方式: 转化 接合 性导 转导 ●掌握F+、 F-、Hfr、F′的区别 ●理解和掌握中断杂交作图原理 □ 细菌基因组的特点 A 基因组较小 B 染色体不与组蛋白结合,裸露DNA C 基因的结构简单 D 不具备明显的核结构 噬菌体的种类 毒性噬菌体(virulent phage) 能在宿主菌细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体,并最终裂解细菌,称为毒性噬菌体 温和噬菌体(temperate phage)/ 溶原性噬菌体(lysogenic phage) 噬菌体基因与宿主菌染色体整合,不产生子代噬菌体,但噬菌体DNA能随细菌DNA复制,并随细菌的分裂而传代 毒性噬菌体复制周期 吸附 穿入 生物合成 成熟与释放 !温和性噬菌体 !烈性性噬菌体 !溶源性(溶源性细菌、原噬菌体 ) !裂解途径(lytic pathway) !溶源途径 (lysogenic pathway) 三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性 作为遗传研究材料具有独特优势 世代周期短,繁殖世代所需时间短 易于操作管理和进行化学分析(纯培养与代谢产物累积) 便于研究基因的突变(表现与选择) 便于研究基因的作用机理(突变型生长条件与基因作用) 便于研究基因的重组(重组群体大、选择方法简便有效) 遗传物质比较简单,可作为研究高等生物的简单模型 在研究基因结构、功能与表达调控时更为简便 因此:了解微生物遗传研究有助于理解多年来分子生物学、分子遗传学理论发展 四、细菌遗传的实验研究方法 (一) 细胞计数(培养物细胞浓度) (二) 建立纯系的方法 (三) 选择培养法鉴定突变型与重组型 (四) 突变型与重组型的批量筛选方法 *(一) 细胞计数(培养物细胞浓度) *(二) 建立纯系的方法——纯培养 挑取由单个细胞繁殖而来的菌落进行培养就可以获得由一个细胞繁殖而来的纯系 通常采用平板表面涂布法或划线法可以获得单菌落。这种方法获得的纯系,称为“菌种纯” 有时采用显微操纵器进行菌丝尖端切割等方法从单个细胞直接培养建立纯系。采用这种方法获得的纯系称为“菌株纯” Results of the serial dilution technique and subsequent culture of bacteria 营养缺陷型(auxotroph): 不能在基本培养基上生 长。如:met-、lys-、pro- 、bio-等。 野生型(prototroph): 能在基本培养基中生长。 如met+、lys+ 、pro+、bio+ 等。 糖类不发酵突变型:不能以某糖作碳源。如:lac- ,野 生型lac+。 抗性突变型:能在含某种药物的培养基生长。如: strr。 野生型或敏感型:strs。 能在含噬菌体的环境下生存。如:tonr。 野生型或敏感型:tons。 培养基的类型: 基本培养基(野生型) 完全培养基(突变型) 补充培养基(具体突变类型的确定) (三) 选择培养法鉴定突变型与重组型 许多细菌突变都与培养基成分、培养条件有关 营养缺陷型的筛选、鉴定: 选择培养法是根据原养型(也称为原生营养型)与营养缺陷型在基本培养基和营养培养基上的生长能力差异进行筛选 其它突变类型的筛选、鉴定: 对于其它的突变类型(如温度敏感型),也可以通过培养条件的选择培养来筛选与鉴定 突变型的筛选 例如: 营养缺陷型的筛选: 野生型细菌 ? 完全培养基: ? 影印培养 基本培养基: ? 补充培养基

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