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噬菌体重组分析、顺反测验和缺失作图 细菌基因重组的特点 细菌的中断杂交实验与基因作图 细菌的转化与转导 细菌和病毒在遗传研究中的优越性 世代周期短 T7phage 20—30min E.Coli 20min 群体大 一支试管 数以百万计 遗传物质简单 一条裸露的核酸 单倍体 不存在显隐关系 第一节 病毒的一般特性及类型 一. 病毒的一般特性 形体微小,电镜下可见,形态多样。 化学组成简单 核酸+蛋白质 仅含一种核酸 单链或双链 线状或环状 非细胞结构 无线粒体、核糖体等 缺乏独立代谢能力 繁殖方式独特 具有双重存在方式 对抗生素不敏感,对干扰素敏感 二 病毒的类型 微生物病毒 寄生于细菌、真菌、单细胞藻 植物病毒 寄生于植物细胞 如 TMV 动物病毒 如 流感病毒、乙肝病毒等 亚病毒 (比病毒更为简单的生命形式) 类病毒 仅含核酸 拟病毒 如 RNA-1和RNA-2相互依赖 朊病毒 蛋白质病毒 三 噬菌体的生活周期 1.烈性噬菌体 侵染宿主后使宿主细胞裂解的噬菌体 增殖过程包括 吸附、侵入、核酸复制与蛋白质合成、装配及释放。 生活周期存在两种途径: 裂解途径 溶源途径 λ噬菌体的溶源化和原噬菌体的形成 噬菌斑 第二节 噬菌体的染色体作图 一.噬菌体的表型与噬菌体遗传学 快速溶菌突变体 r 形成较大的噬菌斑 野生型r+ 形成较小的噬菌斑 噬菌体的杂交和重组 第 三 节 细菌的染色体作图 接合 转化 细菌的细胞和染色体结构 细胞结构 细胞膜 拟核 细胞质(核糖体) 细胞壁 (鞭毛 伞毛 荚膜 芽胞) 与真核细胞的差异 缺乏线粒体、叶绿体,无核膜; 染色体 裸露的共价闭合环状双链DNA分子 附加体 小型环状DNA(质粒) 游离或整合状态 一. 接合 1. 接合现象的发现 1946年 J.Leaderberg和E.Tatum 2. F因子及其转移 2. F因子及其转移 Hfr菌株的染色体 Hfr×F﹣→ 3. 中断杂交试验及染色体作图 步骤: 用中断杂交法确定的几个Hfr菌株的基因顺序 4. 细菌重组与E.Coli染色体作图 二. 转化 三. 性导 F′因子的主要用途 四. 转导 2. 普遍性转导(一般性转导) 2. 普遍性转导(一般性转导) 普遍性转导与作图 根据重组体频率推导基因顺序 3. 局限性转导(特殊性转导) 小结 噬菌体遗传重组 重组作图 缺失作图 互补测验 大肠杆菌噬菌体T4的三点测验(mrtu×+++) 在大肠杆菌中,thr和leu两个基因在细菌基因组中相距约为2%,试问这两个基因能否用P1噬菌体进行并发转导?为什么? 如果能,其频率如何? P1噬菌体可包裹2.4%E.Coli基因组,能包裹此两个基因 X = ( 1 - — ) 3 = 0.46% 2 2.4 利用合转导频率测定基因的连锁关系: 供体 leu+ thr+ arir → 受体 leu﹣ thr﹣ aris 实验 选择基因 未选择基因 结论 1 leu+ 50% azir ,2% thr+ leu azi 较近 2 thr+ 3 %leu+ , 0 %azir thr leu 相邻 3 leu+ thr+ 0% ari r ari 在边上 azi thr leu 在以P1噬菌体进行的普遍性转导系统中,供体菌株的基因型为pur+
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